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目的:研究人肺腺癌组织中细胞色素C氧化合成酶2(synthesis of cytochrome c oxidase 2,SCO2)和p53诱导糖酵解和调亡调节因子(TP53-induced glycolysis and apoptosis regulator,TIGAR)的表达与能量代谢的关系及其临床意义,同时探究人肺腺癌细胞中,窖蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)下调与姜黄素联合处理时,SCO2和TIGAR表达的改变及对细胞的活性和糖代谢的影响,期望为肺腺癌的发病机制及靶向治疗提供理论依据。方法:第一部分:采用量子点免疫荧光组织化学的方法,检测SCO2、TIGAR和p53在肺腺癌组织中的表达情况,结合临床预后资料对结果进行统计学处理和生存分析。第二部分:采用MTT法检测姜黄素对肺腺癌细胞系A549和SPC-A-1细胞活力的影响;利用细胞免疫荧光技术检测Cav-1、SCO2和TIGAR的细胞定位及姜黄素对细胞形态和密度的改变;通过实时定量荧光PCR技术(qPCR)检测姜黄素(40μM)处理SPC-A-1不同时间点Cav-1、p53、sCO2和TIGAR mRNA的表达,Western blot检测相关蛋白的表达。同时采用Western blot检测不同浓度(0、5、10、20、30、40μM)的姜黄素处理时,Cav-1、p53、SCO2、TIGAR蛋白的表达。最后采用siRNA技术敲除A549细胞中Cav-1的表达,Western blot检测细胞中Cav-1蛋白水平的敲除效率及SCO2和细胞周期素(cyclinD1)的蛋白表达。结果:第一部分:1.肿瘤细胞中p53和SCO2的阳性率与肺腺癌患者临床病理参数均无关(P>0.05),而肿瘤细胞中TIGAR的阳性率与患者性别和吸烟史均有关(P<0.05);2.生存曲线表明,SCO2和TIGAR高表达的肺腺癌患者,预示着不良的生存率和较高的死亡率(P=0.024;P=0.030);3.SCO2和TIGAR的表达呈显著正相关(P=0.019,rs=0.271);4.在Cox比例风险模型多变量分析中,肿瘤细胞中TIGAR(HR=2.819,95%CI=1.101-7.216,P=0.031)和肿瘤大小(T)(HR=0.343,95%CI=0.149-0.792,P=0.012)是肺腺癌预后的独立指标。第二部分:1.姜黄素对A549和SPC-A-1细胞的生长具有抑制作用,并呈时间-剂量依赖性,并能抑制cyclinD1蛋白的表达;2.免疫荧光结果显示SC02和TIGAR蛋白定位于细胞质;姜黄素处理细胞后,细胞数量显著下降,细胞形态发生较大变化,主要表现为变小,变圆;3.在SPC-A-1细胞中,随着姜黄素(40μM)处理时间的延长,qPCR检测到SC02和TIGAR的mRNA的表达先下调后上调;而Cav-1的mRNA变化不显著;p53 mRNA呈现显著下调的趋势;但Western blot检测到Cav-1、TIGAR、cyclinD1蛋白表达均显著下调;4.Western blot结果显示:在SPC-A-1细胞中,随着姜黄素药物浓度的增加,Cav-1蛋白表达呈现下调趋势,而其他蛋白均无显著性变化;然而,在A549细胞中,随着姜黄素浓度的增加,Cav-1和SC02蛋白表达呈现下调趋势,但p53蛋白表达差异不显著;5.在A549细胞中,姜黄素能够显著抑制Cav-1和SC02蛋白表达。此外,siRNA能敲除Cav-1的表达,同时显著下调SC02蛋白表达。当姜黄素与Cav-1 siRNA同时处理A549细胞时,对Cav-1和SC02的抑制作用更加显著(P<0.05)。结论:1.SC02和TIGAR的高表达与肺腺癌的不良预后显著相关;2.姜黄素能抑制肺腺癌A549和SPC-A-1细胞增殖,可能通过下调Cav-1的表达而实现;3.在肺腺癌细胞中Cav-1可能通过调控SC02的表达,进而影响肿瘤能量代谢。