目的:　　 (1)制备自亚微乳化柿叶提取物胶囊并对其特性和化学稳定性进行研究。　　 (2)建立和确证同时测定比格犬血浆中槲皮素、山柰酚浓度的LC-MS/MS方法。　　 (3)以自制新制剂自亚微乳化柿叶提取物胶囊为受试制剂，以市售柿叶提取物片为参比制剂，研究自亚微乳化胶囊在比格犬体内的药代动力学及生物利用度，为进一步研究自亚微乳化胶囊提供科学依据。　　 方法:　　 (1)按处方和工艺制备自亚微乳化柿叶提取物胶囊，采用体外乳化试验、粒径、崩解时限和含量测定进行质量评价，高低温循环和光照试验进行稳定性考察。　　 (2) LC-MS/MS方法建立与确证：以乙醚-丙酮为提取溶剂，提取前采用酸水解将柿叶黄酮结合物转化为苷元槲皮素和山柰酚，选用异鼠李素为内标物，以乙腈(含0.1％甲酸)：水(含0.1％甲酸)(55:45，V/V)为流动相、Waters X Terra C18为色谱柱：通过电喷雾电离(ESI)源正离子多反应离子监测(MRM)扫描方式进行LC-MS/MS分析，同时测定比格犬血浆中槲皮素、山柰酚的浓度，根据药代动力学相关指导原则对特异性、标准曲线、回收率、精密度与准确度、稳定性等指标进行方法学确证。　　 (3)自亚微乳化柿叶提取物胶囊比格犬药代动力学试验研究：比格犬6只，雌雄各半，随机分组，采用自身对照，单次空腹口服药物(柿叶提取物片500 mg及自亚微乳化柿叶提取物胶囊500mg)。应用上述LC-MS/MS法测定比格犬血浆中不同时间槲皮素和山柰酚的浓度，根据所得血浆药物浓度.时间曲线计算各主要药代动力学参数。　　 结果:　　 (1)自亚微乳化柿叶提取胶囊的平均粒径为165.9nm，平均崩解时间为5.6 min，含量在90％～110％范围内，高低温循环和光照10天后含量没有变化。　　 (2)建立了同时测定比格犬血浆中槲皮素、山柰酚浓度的LC-MS/MS方法，方法学确证结果表明，该方法特异性好，无内源性杂质干扰。槲皮素和山柰酚在20～1500ng/ml范围内线性关系良好，定量下限为20ng/ml。槲皮素批内精密度RSD为2.8％～12.5％，批间精密度RSD为0.7％～5.2％；山柰酚批内精密度RSD为1.7％～5.2％，批间精密度RSD为0.7％～3.3％。槲皮素的平均提取回收率为41.0％～42.0％，平均相对回收率为94.1％～98.5％；山奈酚的平均提取回收率为42.2％～44.2％，平均相对回收率为90.5％～95.6％。血浆样品在室温放置4h，冰冻(-70℃)条件放置28 d和冻融2次下槲皮素和山柰酚的偏差均在15％内。　　 (3)自亚微乳化柿叶提取物胶囊药代动力学研究结果：参比制剂与受试制剂槲皮素的Cmar分别为(194.5±82.1)ng/ml及(404.2±52.8)ng/ml；Tmax分别为(2.2±1.0)h及(5.3±1.0)h；Ka分别为(1.3±0.4)1/h及(0.3±0.1)1/h； MRT0-24分别为(6.9±1.1)h及(6.8±0.4)h；MRT0-∞分别为(9.2±2.4)h及(9.8±3.8)h；AUC0-24分别为(1585.7±470.4)ng/ml·h及(3298.4±567.2)ng/ml·h；AUC0-∞分别为(1764.6±505.0)ng/ml·h及(3566.3±561.2)ng/ml·h；受试制剂相对于参比制剂的生物利用度F为(215.8％±69.8％)；参比制剂与受试制剂山柰酚的Cmax分别为(51.2±19.3) ng/ml及(77.7±21.2)ng/ml；Tmax分别为(2.0±0.0 h)及(1.8±0.4)h；Ka分别为(3.2±4.4)1/h及(1.0±0.7)1/h； MRT0-24分别为(7.5±2.3)h及(7.8±1.7)h；MRT0-∞分别为(29.8±10.6)h及(16.9±3.6)h：AUC0-24分别为(529.7±284.0) ng/ml·h及(741.1±205.0)ng/ml·h；AUC0-∞分别为(1136.4±508.6)ng/ml·h及(1063.7±94.1)ng/ml·h；受试制剂相对于参比制剂的生物利用度F为(115.9％±62.8％)。　　 结论:　　 (1)制剂粒径小，体外崩解时间短，对热和光稳定，预示能提高体内生物利用度。　　 (2)建立和确证了同时测定比格犬血浆中槲皮素、山柰酚浓度的LC-MS/MS方法。　　 方法学确证结果表明，该方法简便可靠，具有特异性强、精密度与准确度高、灵敏度好等特点。　　 (3)与柿叶提取物片比较，自亚微乳化柿叶提取物胶囊明显提高了槲皮素的生物利用度，但山柰酚的生物利用度没有多大变化。