肿瘤微环境响应型纳米光敏剂的构建及性能研究

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纳米载体凭借其尺寸小、靶向性强、毒副作用小等优点,相较于传统的癌症诊断与治疗手段具有突出的优势。为了将癌症的诊断与治疗功能相结合,同时提高纳米载体在肿瘤靶点的释放效率,本论文设计了一种响应肿瘤还原性微环境的诊疗一体的纳米光敏剂。主要通过合成具有GSH响应效果的聚合物PSMA-SS-TPS,并将其与具有光动力治疗效果的光敏剂ZnPc混合,通过共沉淀注入法制备了具有诊疗功能的GSH响应型纳米光敏剂。对该纳米光敏剂进行性能表征,并将其应用于细胞水平,得到了较好的诊疗效果。主要工作内容如下:1.首先分三步合成了聚合物PSMA-SS-TPS,并通过吸收-发射光谱、傅里叶红外光谱、核磁共振氢谱和质谱等对各步产物进行分析表征,证明该聚合物已制备完成。2.针对PSMA-SS-TPS中的二硫键(S-S)可以被GSH还原断裂,以及断键导致释放的荧光分子TPS发生聚集诱导发光(AIE)的特性,分别在有机溶剂THF、去离子水和接近细胞环境的PBS中验证聚合物PSMA-SS-TPS对GSH的响应效果。发现PSMA-SS-TPS在加入GSH的PBS中,仅8min TPS的荧光强度增强1.4倍,说明该聚合物具有较好的GSH响应效果。采用共沉淀注入法制备诊疗一体的纳米颗粒,并通过调整光敏剂ZnPc的掺入比例对纳米颗粒进行优化。通过光动力治疗效果和GSH响应测试,得到构成纳米光敏剂的最佳比例为 ZnPc:PS-PEG-COOH:PSMA-SS-TPS=4:10:86。通过 DLS、TEM和Zeta电位分别对该纳米光敏剂进行表征,发现其为形貌均一的球形,粒径大小约为50 nm,表面呈负电性。3.以乳腺癌MCF-7细胞为实验对象,通过细胞暗毒性实验,证明纳米光敏剂的浓度小于182 μg/mL时对细胞无毒。通过光毒性实验和共聚焦成像,表明该纳米光敏剂易被肿瘤细胞吞噬,且具有较好的GSH响应效果,可用于对肿瘤细胞的荧光成像与光动力治疗。
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