【摘 要】
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背景食管癌是一种常见的消化道肿瘤,发病率排在恶性肿瘤的第6位,而死亡率排在第4位,我国食管癌发生率高于国外,食管鳞状细胞癌（esophageal squamous carcinoma,ESCC）约占本国食管癌的88%[1-3]。放射治疗作为食管癌的关键局部控制手段之一,常与手术、化学治疗、免疫治疗等手段联用。盐酸安罗替尼是一种新型口服多靶点酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhi
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背景食管癌是一种常见的消化道肿瘤,发病率排在恶性肿瘤的第6位,而死亡率排在第4位,我国食管癌发生率高于国外,食管鳞状细胞癌（esophageal squamous carcinoma,ESCC）约占本国食管癌的88%[1-3]。放射治疗作为食管癌的关键局部控制手段之一,常与手术、化学治疗、免疫治疗等手段联用。盐酸安罗替尼是一种新型口服多靶点酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor,TKI）,可特异性阻断VEGFR,PDGFR,FGFR和c-Kit等多个靶点,具有抗肿瘤血管生成和抑制肿瘤生长的作用,且靶点明确,不良反应小,安全性好[4]。本研究旨在探讨安罗替尼联合放疗在体外对食管鳞癌细胞的生长抑制、促进凋亡及放疗增敏情况。目的探讨安罗替尼联合放射治疗对ESCC细胞的增殖、凋亡及放射治疗敏感性的影响。方法选取对数生长期的食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞,分别用含终浓度为0、2、4、8、16、32、64、128μmol·L-1安罗替尼的培养基进行培养。采用细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8,CCK-8）测量8组不同浓度安罗替尼组食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞的增殖能力,并计算细胞增殖抑制率。应用Graphpad Prism8软件绘制细胞增殖抑制曲线并得到IC50值,选择IC50值最小时的安罗替尼浓度及处理时间作为后续实验的药物处理条件。另收集对数生长期的食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞,随机分为空白对照组、2、4、6Gy单独照射组、单纯安罗替尼组、2、4、6Gy联合照射组。2、4、6Gy单独照射组细胞分别用不含安罗替尼的培养液培养48h后,换为不含安罗替尼的培养液,并予以2、4、6Gy的X射线照射;单纯安罗替尼组、2、4、6Gy联合照射组使用含终浓度为4μmol·L-1含安罗替尼的培养液繁育48h后,更换为不含安罗替尼的培养液,同时分别给予0、2、4、6Gy的X射线辐照。采用平板克隆形成实验检测各组的克隆形成能力,并计算各组的存活分数（SF）。采用单击多靶模型检测安罗替尼联合放射治疗对KYSE-150细胞放射治疗的敏感性的影响。取空白对照组、4Gy单独照射组、单纯安罗替尼组、4Gy联合照射组,同上条件干预后,使用流式细胞仪检测,应用Flowjo软件计算细胞凋亡率。结果1.安罗替尼干预24h时4、8、16、32、64、128μmol·L-1安罗替尼组细胞的增殖抑制率随安罗替尼干预浓度的升高而升高（P＜0.05）;安罗替尼干预48、72 h时,2、4、8、16、32、64、128μmol·L-1安罗替尼组细胞的增殖抑制率随安罗替尼干预浓度的增加而提高（P＜0.05）;安罗替尼处理KYSE-150细胞24、48、72 h时的IC50值分别为12.7±0.5μmol·L-1、3.7±1.0μmol·L-1、6.8±0.7μmol·L-1。2.2、4、6Gy联合照射组细胞的细胞存活分数均显著低于相同照射剂量的单独照射组（P＜0.05）。单独照射组和联合照射组的D0值分别为5.84、4.11,放射增敏比为1.42。3.4Gy单独照射组、单纯安罗替尼组、4Gy联合照射组细胞凋亡率显著高于空白对照组（P＜0.05）;4Gy联合照射组细胞凋亡率显著高于4Gy单独照射组、单纯安罗替尼组（P＜0.05）。结论安罗替尼联合放射治疗可抑制食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞的增殖能力,并增加食管鳞状细胞癌细胞对放射治疗的敏感性,其原理可能是通过增加肿瘤细胞凋亡而达成。
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