【摘 要】
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玉屏风在哮喘和慢性阻塞性肺疾病（COPD）的治疗方面有着积极表现,临床上常采用与化药协同治疗的方式改善肺部炎性疾病患者缓解期的症状,然而这种联合用药的分子机制仍不清楚。课
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玉屏风在哮喘和慢性阻塞性肺疾病（COPD）的治疗方面有着积极表现,临床上常采用与化药协同治疗的方式改善肺部炎性疾病患者缓解期的症状,然而这种联合用药的分子机制仍不清楚。课题从转运蛋白的角度出发,监测玉屏风对OCTN1/2的干预作用,探讨玉屏风与支气管扩张药物联用的分子机制。实验以Ⅱ型肺泡上皮细胞系A549代替人原代上皮细胞,使用Western Blot和q RT-PCR检测OCTN1/2蛋白和m RNA的表达;以ASP+作为探针检测OCTN1/2的底物转运活性,计算米曼常数（Km）;采用Transwell小室体外培养的方法建立单层肺泡上皮细胞模型,观测ASP+的双向跨膜转运过程并计算表观渗透系数(Papp)。结果发现,与LPS诱导的炎症模型组相比,玉屏风及其单味药组能够在不同程度上降低炎症因子IL6和TNF-α的分泌,提高OCTN1/2的表达;各组Km值分别为NC（577.37±82.53μM）、LPS（649.46±88.21μM）、LPS+AR（489.49±101.08μM）、LPS+AMR（581.38±76.22μM）、LPS+SR（601.99±57.75μM）和LPS+YPF（452.81±38.77μM）。与LPS组相比,玉屏风及其单味药组的Km值均存在下降趋势;由A to B方向的ASP+跨膜转运实验发现,玉屏风组的表观渗透系数为(30.22±1.87×10-6 cm/s),其次分别为白术组(27.79±2.44×10-6 cm/s)、防风组(25.80±3.53×10-6 cm/s)和黄芪组(25.56±2.86×10-6 cm/s),均大于LPS组(22.80±0.94×10-6 cm/s)。以上结果表明,LPS诱导的炎症会降低肺泡上皮细胞中OCTN1/2的表达和功能。作为一种中药复方,玉屏风在降低细胞炎症反应的同时,能够提高转运蛋白OCTN1/2的表达及活性,促进底物跨单层肺泡上皮细胞膜的转运吸收。炎症状态下玉屏风对OCTN1/2表达及功能的调节作用,有助于阐明玉屏风、转运蛋白和体内药物递送之间的关系,揭示玉屏风在用于哮喘和COPD治疗时可能存在的药物相互作用,为新药研发提供了潜在的目标靶点。
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