【摘 要】
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卵黄抗体是近年来的一个研究热点,用于多种疾病的预防和治疗,是一种有良好发展前途的生物制剂。本试验成功制备了针对仔猪腹泻的多病原卵黄抗体,并对卵黄抗体效价变化规律、分离
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卵黄抗体是近年来的一个研究热点,用于多种疾病的预防和治疗,是一种有良好发展前途的生物制剂。本试验成功制备了针对仔猪腹泻的多病原卵黄抗体,并对卵黄抗体效价变化规律、分离提取方法、喷雾干燥条件及卵黄粉的稳定性进行了初步研究,试验结果如下所述。
1.卵黄抗体效价变化规律的研究
以引起仔猪腹泻的常见病原大肠杆菌(K88、K99、987P)和传染性胃肠炎病毒、流行性腹泻病毒为抗原,免疫蛋鸡,定期检测卵黄抗体滴度,得出卵黄抗体滴度变化规律:首次免疫抗原后7d可检测到抗体存在,但抗体滴度较低,随后抗体滴度缓慢升高,第2次免疫和第3次免疫后,抗体滴度有个小幅的下降,随后迅速升高,第3次免疫后12d,抗体滴度达到峰值,维持30d后抗体滴度逐渐下降。
2.卵黄抗体分离提取方法比较
从对卵黄的去脂效果、提取液的蛋白含量、提取的抗体纯度和对抗体活性的影响等方面,综合比较了酸化水法、聚乙二醇法、氯仿法和水-辛酸法4种分离提取卵黄抗体的方法,结果显示水-辛酸法效果最好,此种方法提取的抗体脂肪残留量较低、抗体产率高达6.8mg/mL、纯度93.6%,明显优于其它3种提取方法。
3.卵黄粉的制作及稳定性研究
研究了在卵黄中添加不同保护剂及其不同添加比例,喷雾干燥进出口温度对卵黄抗体的影响,结果显示:在卵黄中添加乙醇溶解邻苯二甲酸丙甲基纤维素和淀粉,进口温度145℃,出口温度70℃的条件制备的卵黄粉品质最好。
为研究卵黄粉的稳定性,本试验采用温度梯度、pH梯度及保存条件作为影响卵黄粉中抗体的外部因素,对卵黄抗体稳定性进行了初步研究,结果显示:卵黄粉中抗体对温度稳定性良好,在70℃以下卵黄抗体性质稳定,90℃时抗体活性迅速下降;pH低于4.0,抗体开始失活,pH1.5时活性残余30%;卵黄粉在4℃存放6个月,抗体活性保持不变,25℃存放6个月,活性开始丢失。说明卵黄粉具有耐酸、耐碱,易于保存等优点。
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