下调Borealin对结直肠癌增殖及侵袭迁移的作用

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目的:检测染色体乘客复合体(chromosomal passenger complex,CPC)中Borealin蛋白在结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)中的表达及与其他CPC蛋白的关联性,探究下调Borealin对结直肠癌增殖及侵袭迁移的影响。方法:用免疫组织化学方法检测Borealin、Survivin、Aurora-B及Ki-67在结直肠癌组织中的表达,取正常组织作为对照,统计分析这些蛋白的表达与结直肠癌临床病理学特征之间的关系;筛选高表达的结直肠癌细胞株,采用si RNA的方法下调目的蛋白的表达,从而观察Survivin和Aurora-B在结直肠癌细胞中的表达情况;运用Western blot法、细胞增殖实验、细胞划痕实验、免疫荧光法、Transwell实验来检测Borealin/Dasra B下调对结直肠癌细胞增殖、侵袭迁移能力及相关蛋白表达水平的影响,进一步明确Borealin/Dasra B在结直肠癌发生发展中的作用。结果:1.Borealin在结直肠癌组织中阳性表达率显著高于正常大肠粘膜组织,其差异具有统计学意义(P<0.05),且Borealin在结直肠癌的表达与淋巴结转移、肿瘤分化程度和浸润深度相关(P<0.05)。2.Borealin的表达与Survivin、Aurora-B以及细胞增殖活性标记Ki-67的表达密切相关(P<0.01)。3.在五株结直肠癌细胞中筛选出Borealin高表达的LOVO细胞通过si RNA-borealin进行转染,下调Borealin的表达后发现Survivin、Aurora-B的表达也随之下调,从而进一步说明Borealin的表达与Survivin、Aurora-B呈正相关性。4.细胞转染后形态发生改变,大核多核细胞增多,凋亡细胞增多。5.划痕实验表明肿瘤细胞转染组的愈合率明显低于对照组;Transwell实验显示,转染组迁移或侵袭至小室外的细胞数明显少于对照组。结论:1.Borealin在结直肠癌组织中与Survivin、Aurora-B共同高表达,协同促进肿瘤的发展,并且表达水平与肿瘤的恶性程度与侵袭性呈正相关。2.下调Borealin在结直肠癌细胞中的表达,可以抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力,表明其与结直肠癌的发生发展有重要关系。
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