【摘 要】
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目的:脱氢卡维丁是从岩黄连碱中提取的主要活性化合物,参与许多种类细胞的细胞行为的调节,但脱氢卡维丁对肺癌细胞的作用国内外尚未有相关研究。本实验旨在研究脱氢卡维丁、顺铂单用及联用对肺癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:将人肺腺癌A549细胞培养至对数生长期,用CCK8检测单药不同浓度脱氢卡维丁组（0g/L、0.001g/L、0.002g/L、0.005g/L、0.01g/L）、顺铂以及脱氢卡维丁联用顺铂分
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目的:脱氢卡维丁是从岩黄连碱中提取的主要活性化合物,参与许多种类细胞的细胞行为的调节,但脱氢卡维丁对肺癌细胞的作用国内外尚未有相关研究。本实验旨在研究脱氢卡维丁、顺铂单用及联用对肺癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:将人肺腺癌A549细胞培养至对数生长期,用CCK8检测单药不同浓度脱氢卡维丁组（0g/L、0.001g/L、0.002g/L、0.005g/L、0.01g/L）、顺铂以及脱氢卡维丁联用顺铂分别作用24h、48h、72h后,观察对人肺腺癌A549细胞的增殖抑制情况;采用Annexin V/PI双染流式细胞仪检测单药脱氢卡维丁、顺铂及脱氢卡维丁联用顺铂作用24h后,观察其对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响;RT-PCR检测单药脱氢卡维丁、顺铂及脱氢卡维丁联用顺铂作用24h后细胞内Caspase-3、Survivin m RNA的表达;Western blot检测单药脱氢卡维丁、顺铂及脱氢卡维丁联用顺铂作用24h后细胞内Caspase-3、Survivin蛋白的表达。结果:通过CCK8药物对人肺腺癌A549细胞抑制率数据分析显示随着脱氢卡维丁浓度的增加,作用时间的延长,其对人肺腺癌A549细胞抑制作用呈现明显的时间-剂量效应关系,并且单药组与对应的联合用药组差异具有统计学意义,联合组的抑制作用明显高于各自单用药组;流式细胞术检测单用脱氢卡维丁0.2g/L、单用顺铂0.006 g/L以及脱氢卡维丁联用顺铂可以促进人肺腺癌A549细胞的凋亡,且联合用药组协同增加细胞的凋亡;RT-PCR检测结果显示与阴性对照组相比,脱氢卡维丁0.2g/L组、顺铂0.006 g/L组及脱氢卡维丁联合顺铂组可以上调Caspase-3 m RNA的表达,下调Survivin m RNA的表达,联合组与其他组相比有明显的差异;Western blot检测结果显示与阴性对照组相比,与脱氢卡维丁0.2g/L组、顺铂0.006g/L组及脱氢卡维丁联合顺铂组可以上调Caspase-3蛋白的表达;下调Survivin蛋白的表达,联合组与其他组有明显的差异。结论:本实验证明脱氢卡维丁联合顺铂可以明显协同抑制人肺癌A549细胞的增殖并促进其凋亡,其协同作用可能与下调survivin和上调caspase-3表达有关。为临床上肺癌的诊治提供了一条新的方法和选择。
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