本文拟建立一种可以定量检测PSMA及其变异体PSMA5的实时荧光定量PCR(real-timefluorescentquantitativePCR，real-timeFQ-PCR)的方法，检测PSMA及其变异体在不同前列腺疾病中的表达差异，并对其临床意义进行初步探讨，为深入研究前列腺癌的新型、特异、敏感的前列腺癌的诊断标志物提供新的思路和理论依据。探索PSMA及其变异体在前列腺癌临床诊断中的临床应用。 研究材料与方法：从泌尿系肿瘤细胞株和其它肿瘤细胞标准株、前列腺癌组织、前列腺增生组织、前列腺正常组织及前列腺癌、前列腺增生患者外周血单个核细胞和血浆中提取总的RNA，逆转录合成cDNA。根据PSMA及其变异体PSMA5的共同序列设计一对通用引物Ptotal，再针对PSMA及PSMA5变异体设计各自特异引物，分别用Pwild和P5表示。然后用这三对引物对以上所收集的标本和材料做实时荧光定量PCR分析。比较PSMA及PSMA5在不同组织中以及不同前列腺疾病中的表达情况。 研究结果与讨论：采用自行设计的三对引物Ptotal、Pwild及P5在前列腺癌LNCap细胞株上用实时荧光定量PCR方法可以扩增出特异的产物。并对不同的肿瘤细胞株、不同的前列腺组织及不同的前列腺病例外周血细胞和血浆进行实时荧光定量PCR检测。定量分析的结果显示PSAM及PSMA5具有较好的前列腺组织特异性及病变特异性，尤其是PSMA5具有更好的前列腺组织特异性，有望成为临床诊断和治疗前列腺癌的靶点，对PSMA5的研究拓展了前列腺癌的研究思路，显示出其良好的应用前景。 研究结论： 1.首先建立能定量区别PSMA野生型和PSMA5的PCR方法，为变异体的研究提供一个良好的技术平台。 2.通过应用荧光定量PCR方法，从定性到定量水平证实PSMA5的组织特异性和病变特异性，是一个更好的前列腺癌研究的生物学标志和靶点。 3.首次应用荧光定量PCR方法检测外周血PSMA野生型和PSMA5的表达，PSMA5各项指标都优于一直沿用的PSA，显示了PSMA5良好的应用前景。