肺癌是是恶性程度最高的肿瘤,全球每年有近200万人因患肺癌而去世。常用的治疗方法包括手术切除、含铂化疗以及放疗等治疗手段。尽管新颖的治疗手段不断发展,但肺癌患者的5年生存率仍低于15%。凋亡诱导因子（AIF,apoptosis-inducing factor）是位于线粒体中的一类核黄素氧化还原蛋白,在诱导caspase非依赖的细胞凋亡中发挥着重要的作用,最早是在诱导caspase非依赖的细胞凋亡通路中被发现。AIF在细胞中主要有扮演着两大“角色”:其一,在细胞正常地生理状态下,AIF发挥着它氧化还原酶的功能——催化NAD和Cytc之间的电子的正常传递,维持线粒体氧化呼吸链的正常运作,AIF的缺失会导致线粒体呼吸链的复合物蛋白的量减少。其二,当细胞受到凋亡信号的刺激下,AIF就会被钙蛋白酶剪切,从线粒体的膜上脱落,经分子伴侣结合,入核介导非半胱天冬酶依赖的凋亡途径参与细胞的凋亡过程。根据以往的研究,大多数是AIF在诱导caspase非依赖的凋亡通路的研究,但是对于AIF在肺癌细胞的线粒体所发挥的作用并不是十分地清楚。首先我们通过查找数据库可以看到AIF在肺癌病人的样本中呈现高表达的状态,并且AIF的表达越高,肺癌患者的预后越差,提示AIF可能在肺癌的发生发展过程中扮演着重要的角色,而且很可能是对肺癌的进程起着促进的作用。其次,通过构建敲低AIF的细胞株,并用MTT实验以及克隆形成实验检测敲低细胞的增殖能力,发现敲低AIF可以比较明显地抑制了肺癌细胞的增殖。Transwel小室实验等实验结果表明,肺癌细胞敲低AIF之后的侵袭和迁移能力大大地降低。之后通过敲低回补同义突变的AIF,发现细胞的增殖和侵袭、迁移能力都得到了恢复。进一步探究AIF在肺癌细胞中的分子生物学机制,发现敲低AIF蛋白的肺癌细胞的周期相对于敲低对照组的,细胞的周期被阻滞在G2期。通过查阅相关文献得知,G2期主要是有CDK1/cyclinB1蛋白介导运转的,于是通过West blot检测了 CDK1和cyclinB1的mRNA和蛋白水平,发现敲低AIF的细胞的CDK1的mRNA和蛋白水平没有变化,但是mRNA水平不变,cyclinB1的蛋白水平下调。根据已有的文献报道,CDK1/cyclinB1不仅在细胞核中发挥作用一周期运转,而且在线粒体也发挥着重要的作用:参与能量代谢。于是,我们检测了敲低AIF后细胞的胞外产酸率,氧耗率,发现两个指标均下降。同时检测了细胞的ROS水平,发现敲低AIF细胞的ROS水平升高。同时免疫荧光实验显示cyclinB1的在线粒体的含量减少,这提示很可能是AIF敲低导致cyclinB1的含量减少进而影响细胞的能量代谢。综上所诉,本文首次证明了敲低AIF可以减少cyclinB1在线粒体上的量,进而影响了细胞的能量代谢,进而抑制了肺癌的增殖和侵袭、迁移。