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乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,发病率逐年增高,且日趋年轻化,严重危害着女性身心健康。其中约有1/3乳腺癌患者雌激素受体表达阴性,与表达阳性者相比,此类乳腺癌恶性程度高,预后差,尽管以手术、放疗、化疗为主的综合治疗已极大地提高了该类患者的生存率,但仍有较高的复发、转移率。三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO,As2O3)俗称砒霜,20世纪70年代被用于治疗急性早幼粒白血病(acute promyelocytic leukemia, APL),疗效显著且无严重毒副作用,之后备受关注,成为医学界研究焦点。越来越多的研究显示,除血液肿瘤细胞外,As2O3对多种实体瘤细胞有诱导凋亡和／或抑制生长的作用。但是As2O3应用于乳腺癌中的研究相对较少。本实验以雌激素受体阴性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231为研究对象,观察三氧化二砷对该细胞增殖、细胞形态、细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响情况,探讨其可能的作用机制,为其将来可能应用乳腺癌临床治疗提供理论依据,以便能为该患者群开辟新的治疗途径。目的观察不同浓度As2O3对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖、细胞凋亡的影响,探讨其诱导凋亡的作用机制。方法将不同浓度的As2O3与MDA-MB-231细胞共同培养不同时间后,用MTT法检测As2O3对MDA-MB-231细胞的生长抑制作用；相差显微镜下观察细胞形态；应用原位缺口末端标记(TdT-mediated dUTP nick and labeling,TUNEL)检测细胞凋亡；免疫细胞化学技术检测细胞内survivin和caspase-3蛋白的表达情况。结果1.不同浓度的As2O3均能体外抑制MDA-MB-231细胞生长,且存在剂量、时间-效应关系,其24h IC50为43.13μM,48h IC50为5.64μM,72h IC50为1.96μM。2.相差显微镜下可见被As2O3作用24h后的MDA-MB-231细胞随作用浓度增加形态逐渐改变。对照组细胞贴壁良好,梭形或椭圆形,胞质均匀,细胞间紧密连接成片；实验组随As2O3作用浓度的增加,贴壁细胞逐渐减少,胞质内颗粒物质增多,细胞变圆,间隙增大。3.TUNEL法检测细胞凋亡,光镜下观察显示,对照组和经各浓度As2O3作用24h后的实验组细胞胞核均出现阳性染色,对照组仅个别细胞出现阳性染色；各组的阳性染色区平均灰度值存在差别(P<0.05),阳性染色区平均灰度值随着作用浓度的增加而增高。4.三氧化二砷作用于MDA-MB-231细胞24h后,免疫细胞化学染色显示,随着药物浓度增加,Survivin蛋白表达减少而Caspase-3蛋白表达增加(P<0.05),且两者呈负相关(P<0.001)。结论1.As2O3对体外培养的MDA-MB-231细胞增殖有抑制作用,并存在剂量、时间-效应关系。2.As2O3在体外可以诱导MDA-MB-231细胞凋亡,凋亡效应与剂量呈正相关。3.As2O3抑制survivin表达而激活caspase-3可能是其体外诱导凋亡机制之一。