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目的:心房钠尿肽（ANP）具有排钠利尿,参与水盐平衡的调节作用,同时可以抑制细胞增殖,减轻心肌肥大和心肌纤维化,参与免疫调节和血压调节等过程。此外,ANP在抵制缺血再灌注损伤和心肌梗死等心肌保护作用中同样发挥重要的调节作用。胰高血糖素样肽-1（GLP-1）是一种促胰岛素激素,其作为一种新的治疗2型糖尿病的药物已被广泛应用于临床研究。同时,GLP-1也具有心肌保护作用,包括优化心肌代谢,通过与心脏受体结合,并通过亚细胞缺血调节途径信号传导来直接保护心脏。但是,对于心血管疾病均具有保护作用的两种激素GLP-1和ANP之间的分泌调节作用尚不清楚。本实验选择G蛋白偶联受体激活的信号通路PI3K/Akt/m TOR探究GLP-1类似物利拉鲁肽（Liraglutide）调节心房ANP分泌的机制。基于Liraglutide对心房搏动压的影响,实验选择钙离子调控蛋白Cathepsin K和Piezo1进行进一步的机制研究。因此,本实验利用急性冠脉综合征临床患者血浆样本、离体搏动的大鼠心房灌流模型、在体小鼠模型以及DPP-4基因敲除小鼠模型,观察Liraglutide调节ANP分泌的作用,并同时探讨PI3K/Akt/m TOR、Cathepsin K以及Piezo1在Liraglutide调节ANP分泌中的作用机制。方法:（1）急性冠脉综合征包括急性心肌梗死和不稳定型心绞痛,心肌梗死分为ST段抬高型心肌梗死和非ST段抬高型心肌梗死。本研究收集临床患者患者血浆样本,测定患者血浆样本中GLP-1和ANP含量。（2）离体大鼠心房灌流实验:实验模型为改良的离体搏动大鼠心房灌流模型。实验全程观察心房搏动压变化,每10min取一个搏动压峰峰值进行计算。每30min接取心房灌流液以测量心房ANP含量,ANP含量测定选用放射免疫分析法。实验结束后,摘取各实验组心房以进行蛋白含量测定。（3）在体小鼠实验:实验分组包括对照组和Liraglutide组。两周后,右心取血,离心后取上清进行ANP含量测定,并摘取心脏以备蛋白免疫印迹方法进行蛋白含量测定。（4）DPP-4基因敲除小鼠实验:实验分组包括对照组和Liraglutide组。两周后,右心取血,离心后取上清进行ANP含量测定,并摘取心脏以备蛋白免疫印迹方法进行蛋白含量测定。结果:（1）收集急性冠脉综合征临床患者血浆样本,GLP-1含量测定结果显示,STEMI组、NSTEMI组及UA组GLP-1浓度明显降低;测定血浆ANP含量结果显示,UA组血浆ANP含量略微增加,而STEMI组、NSTEMI组血浆ANP含量明显增加。（2）在大鼠离体搏动的心房灌流模型中,用不同浓度Liraglutide进行心房灌流实验,浓度分别为1.6 nmol/L;2.4 nmol/L;3.2 nmol/L;4.8 nmol/L。ANP测定结果显示,Liraglutide浓度在1.6 nmol/L时心房ANP分泌没有明显变化,Liraglutide浓度在2.4 nmol/L、3.2 nmol/L和4.8 nmol/L时降低心房ANP的分泌,且Liraglutide浓度为3.2 nmol/L时比其浓度在4.8 nmol/L时,降低心房ANP分泌的作用更为显著。搏动压结果显示,Liraglutide浓度为1.6 nmol/L;2.4 nmol/L;3.2 nmol/L;4.8 nmol/L均可显著降低离体大鼠心房搏动压。（3）小鼠在体模型和DPP-4基因敲除小鼠模型中,DPP-4-/-小鼠注射Liraglutide后,其血浆ANP含量明显下降。（4）在大鼠离体搏动的心房灌流模型中,选用0.3 nmol/L Exendin9-39,进一步观察离体大鼠心房ANP分泌和搏动压的变化。ANP测定结果显示,Exendin9-39在给予30分钟后分泌明显增加,并且在给予90分钟时达到高峰。搏动压结果显示,Exendin9-39心房搏动压虽然呈下降趋势,但Exendin9-39在一定程度上抑制利拉鲁肽降低心房搏动压的作用。（5）在大鼠离体搏动的心房灌流模型中,选用10μmol/L PI3K抑制剂LY294002,进一步观察离体大鼠心房ANP分泌和搏动压的变化。ANP测定结果显示,LY294002预处理30分钟后,LY294002和Liraglutide联合使用30min至60min时,可明显抵制Liraglutide降低ANP分泌的作用。搏动压结果显示,预处理LY294002 30min后,LY294002与Liraglutide联合使用时,LY294002并不能抵制Liraglutide降低搏动压的作用。（6）Western blot离体结果显示,Liraglutide明显上调GLP-1R的表达,Exendin9-39可降低Liraglutide对GLP-1R表达的作用。Liraglutide明显上调PI3K/Akt/m TOR的表达;Exendin9-39则使PI3K/Akt/m TOR的表达显著降低。Liraglutide明显下调Piezo1的表达;Exendin9-39略微抵制了Liraglutide对Piezo1的抑制作用。给予Exendin9-39后,Cathepsin K表达上调。（7）Western blot在体结果显示,WT小鼠尾静脉注射Liraglutide后,明显上调GLP-1R表达;DPP-4-/-小鼠GLP-1R表达明显上调;注射Liraglutide的DPP-4-/-小鼠GLP-1R的表达进一步上调。尾静脉注射Liraglutide的WT小鼠PI3K/Akt/m TOR表达上调;DPP-4-/-小鼠PI3K/Akt/m TOR表达上调;DPP-4-/-小鼠给予Liraglutide后,上调PI3K/Akt/m TOR的作用更为显著。WT小鼠尾静脉注射Liraglutide下调Piezo1的表达;DPP-4-/-小鼠注射Liraglutide 14天后,Piezo1蛋白表达明显下调。DPP-4-/-小鼠下调Cathepsin K的表达;WT小鼠尾静脉注射Liraglutide后,下调Cathepsin K的表达;DPP-4-/-小鼠给予Liraglutide后下调Cathepsin K表达的作用更为显著。结论:Liraglutide通过激活GLP-1R减少心房ANP分泌,并降低心房搏动压。PI3K/Akt/m TOR信号路径、Piezo1和Cathepsin K可能参与Liraglutide调节心房ANP分泌和心房搏动压的机制。