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花生（ArachishypogaeaL.）是我国重要的油料作物和经济作物之一，但由于已有的花生资源可利用基因的匮乏或其与不良性状的紧密连锁，极大的限制了杂交育种途径在选育高产、优质、抗逆性强或特用花生新品种上的有效应用。诱变技术的应用可促进花生种质资源创新和加速品种改良进程，因为诱变育种可以诱导产生自然界不存在的或极为罕见的新性状、新类型。与常规诱变育种相比，离体诱变可以得到丰富的变异体，提高变异频率，增加选择几率，大大降低嵌合体的比例，定向筛选可节省大量人力物力财力，并且诱变材料不受季节限制。本研究首先对花生组织培养体细胞胚胎发生及植株再生方法进行了研究，确立了高频率植株再生体系。然后以此体系为基础，进行了花生离体诱变研究。主要研究内容如下:
1.以花育20号、花育22号、花育23号、花育25号和鲁花11号的胚小叶为外植体，对花生胚胎发生途径植株再生进行了研究。将胚小叶外植体培养在添加不同浓度2，4-D的培养基上诱导体胚形成。3周后统计结果表明，花生品种不同及添加2，4-D浓度不同，体胚诱导率有显著差异。花育23号在添加5mg/L2，4-D培养基上获得，了较高的体胚诱导率(74.6％)，花育20号在添加5mg／L和10mg/L2，4-D培养基上体胚诱导率没有显著差异（78.9％和80.1％），而花育22号、花育25号和鲁花11号均在添加10mg/L2，4-D培养基上体胚诱导率最高（分别为92.9％、91.3％和92.3％）。将形成体胚的外植体分别转移到不舍激素或添加BAP、GA3、ABA、TDZ的培养基上，促进体胚萌发再生植株。转移9周后统计植株再生率。结果表明，添加激素不同，植株再生率存在显著差异，5个供试品种均在添加4mg/LBAP的培养基上体胚萌发正常，植株再生率最高，除花育23号植株再生率为74.6％外，其它供试品种植株再生率均达85％以上。每个外植体上可获得10-20个再生小苗。
2.采用快中子辐射与组织培养相结合进行了离体诱变研究。以上述再生体系为基础，以花育22号和鲁花11号两个花生品种的成熟饱满种子为辐射材料，快中子辐射剂量设计3个处理(9.7、14和18Gy)。辐照处理后的种子经表面杀菌后，取胚小叶培养在添加10mg/L2，4-D的培养基上。结果显示，体胚诱导率和愈伤组织诱导率因辐射剂量的不同表现出明显的差异。随辐射剂量的增加，外植体直接形成体胚的频率显著下降，而外植体形成愈伤组织的频率显著增加。培养4周后，将所有外植体转移到添加4mg/LBAP的培养基上进行培养，促进体胚萌发及植株再生，最终外植体再生植株的频率随辐射剂量的增加显著下降。再生植株准备通过嫁接移栽田间，从中筛选优良突变体。
3.以平阳霉素(PYM)为诱变剂对花生离体诱变进行了研究。利用上述确立的胚胎发生及植株再生体系，以花生品种花育20号、花育22号、花育23号、花育25号和鲁花11号成熟种子的胚小叶为外植体，将诱导培养基中添加不同浓度的PYM(0，1，2，3，4,5mg/L)，进行体胚的诱导及诱变处理。结果表明:PYM对体胚发生有显著的抑制作用，随着平阳霉素浓度的增大，体胚诱导率显著下降，外植体褐化率急剧上升。并且不同品种的PYM抑制浓度不同。综合外植体褐化率和体胚形成率，确定花育23号适宜的PYM离体诱变浓度约为1mg/L，花育20号为3～4mg/L，花育22号、花育25号和鲁花11号均为4～5mg/L，诱变培养时间为4w。
为定向筛选耐盐和抗旱变异体，分别将培养基中添加不同浓度的NaCl和羟脯氨酸(HYP)，根据体胚形成及植株再生情况，确定其耐盐和抗旱临界浓度。结果表明，5个供试品种的抗逆耐受值无差异，15g／L和20g/LNaCl为体胚和再生苗的盐筛选压，4mmol/L和8mmol/LHYP为体胚和再生苗的抗旱筛选压。筛选得到的变异体经嫁接、驯化移栽后，进一步鉴定其耐盐或抗旱性。