小麦细胞周期调控基因TaCDC48的克隆和功能分析

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lukexingmm
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
细胞周期活动是生物体最基本的生理活动之一,细胞周期调控因子(CDC48)通过激活周期蛋白依赖激酶(CDK)参与调控细胞分裂。细胞分裂活动的重启与植物体细胞胚胎发生能力的获得和愈伤组织脱分化状态的维持密切相关。本研究以小麦品种科农199(KN199)为材料,通过同源比对克隆得到小麦的细胞周期调控基因TaCDC48,通过对TaCDC48进行分子生物学分析以及转基因功能鉴定,以期进一步明确细胞周期调控基因对体细胞胚胎发生的影响,以及TaCDC48在提高植物细胞分裂效率方面的作用。主要研究结果如下:1、小麦TaCDC48基因的克隆及表达特性分析。利用同源比对技术克隆得到小麦TaCDC48基因,TaCDC48在小麦生长旺盛的幼穗及胚性愈伤中的表达量高于其他组织,且能够在小麦愈伤组织诱导和分化的早期阶段响应表达。2、TaCDC48和TaSERK1蛋白的互作验证。同时利用酵母双杂交技术和双分子荧光互补技术证明了TaCDC48和TaSERK1的互作关系,二者在细胞质中发生互作,暗示,TaCDC48可能通过与TaSERK1蛋白的相互作用,以形成复合物形式参与植物体细胞胚胎发生过程。3、TaCDC48转基因拟南芥功能鉴定。构建了TaCDC48超表达拟南芥载体,通过农杆菌介导法转化拟南芥并获得了超表达植株。对超表达拟南芥植株进行功能分析,结果发现,TaCDC48基因能够在低温条件下促进种子萌发,而在正常温度条件下没有促进作用;与野生型拟南芥相比,TaCDC48能够促进转基因拟南芥的DNA的复制效率并使植株提前抽薹。4、TaCDC48转基因小麦植株获得。构建了TaCDC48超表达小麦载体,通过基因枪法将重组质粒转化进小麦愈伤组织,愈伤组织经筛选再生培养后获得了再生小麦植株。利用PCR技术对T0代小麦植株进行鉴定,共获得了3株转基因小麦植株。综上所述,小麦细胞周期调控蛋白TaCDC48能够与体细胞胚胎发生受体类激酶TaSERK1相互作用并参与小麦体细胞胚胎发生过程。拟南芥转基因功能鉴定证明,TaCDC48基因能够促进植物种子萌发,影响植株抽薹表型,可能与TaCDC48基因调控细胞周期活动有关。
其他文献
创新社区对企业的新产品开发工作具有重要意义,是顾客参与新产品开发的重要手段。创新社区在蓬勃发展的过程中,也面临着一个现实挑战,即创新社区中的信息未能被新产品开发人员充分采纳。已有文献对创新社区中新产品开发人员信息采纳行为影响机理中的影响因素进行了研究,积累了大量的研究成果,但也存在一些亟待进一步研究的问题。基于这样的研究背景,本研究在全面梳理创新社区中新产品开发人员信息采纳行为影响机理中的影响因素
在“信息过载”时代,个性化推荐系统成为研究热点,它可以根据用户信息需求快速主动地进行推荐,省略掉用户筛选、过滤信息的过程,防止用户遗漏重要信息。同时,它又存在一些问题,例如评分数据稀疏和“冷启动”问题。因此,如何有效解决这些问题,准确进行推荐,成为目前主要的研究内容。推荐系统中信息来源有多种:评分数据,项目信息和用户信息。在互联网中,评分数据和项目信息作为公共资源可轻易获取,如果提取项目特征时从项
Diophantine方程和Smarandache函数的均值问题是数论中两个极为重要的课题,它们的研究成果极大的丰富了数论内容,但仍有一些尚未解决的问题引起了不少学者的关注及研究.本文利用初等方法、解析方法、代数数论的方法研究了两类Diophantine方程求解问题,以及包含Smarandache函数的均值问题,主要成果如下:1.利用代数数论的方法讨论了Diophantine方程Ax2+B=Cyn
油茶果由茶壳和茶籽组成,茶壳对制取茶油不利,需进行脱壳处理。提高机械化脱壳程度有利于油茶产业的发展。目前我国油茶果破壳机械以挤压碾搓式和撞击式为主。挤压碾搓式破壳
目的:DRAK1即丝/苏氨酸激酶17A(STK17A),是一种普遍表达的激酶,最初被认定为是细胞凋亡的调节因子。其在恶性肿瘤中的表达及生物学功能是局限的,并且其在非小细胞肺癌中的角
背景重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)是重症医学科较常见的疾病之一,作为胰腺炎最严重的一种分型,其突出特点为起病很急、进展非常迅速、病死率极高,该疾病可
皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)、杂色鲍(H.diversicolor)、西氏鲍(H.gigantea)和绿鲍(H.fulgens)等4种鲍在我国鲍类养殖业中具有重要地位,种业发展需求强烈。然而,其遗传
大黄鱼(Pseudosciaena crocea)是我国单一品种养殖量最大的海水鱼类之一。近年来,大黄鱼养殖业的健康发展受到了病害的严重制约。“内脏白点病”是网箱养殖大黄鱼最常见的病
背景:速激肽受体广泛表达于胃肠道神经元与效应细胞,对维持正常的胃肠道功能至关重要。速激肽由TAC1、TAC3和TAC4三种基因编码,其中TAC4编码HK-1和Endokinins(EKs):Endokinin A
目的:DOT1L作为H3K79的甲基转移酶,被发现在某些恶性肿瘤中扩增和过表达。本研究旨在检测DOT1L在正常胃组织和胃癌组织中表达差异及对胃癌患者生存预后影响,并且检测DOT1L是