复肾功方对慢性肾衰竭大鼠p38MAPK信号通路的影响

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mahongxin2009
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目的本课题从炎症反应角度研究复肾功方对CRF大鼠p38MAPK信号通路及相关炎症因子表达的影响,结合前期实验成果进一步探究复肾功方治疗慢性肾衰竭可能的作用机制,以期为后续开发一个作用机制明确、安全有效的治疗慢性肾衰竭的中成药提供可靠实验依据。方法将55只SD大鼠随机选取11只作为正常组,余下大鼠用0.5%腺嘌呤饲料制备CRF模型,连续3周后,随机抽取4只造模大鼠和1只正常大鼠,尾部静脉采血检测造模是否成功;造模成功后随机分为复肾功低、中、高剂量组和模型组,每组11只,并改为常规饲养;模型组和正常组给予0.9%NaCL(20ml/kg.d)灌胃,复肾功方各组按照原生药材4、8、16g/kg体重比例灌胃水煎剂,1天1次,连续30d。干预治疗结束后,腹腔麻醉、心脏采血,分离腹腔组织,暴露双侧肾脏,剥离肾脏筋膜,止血钳固定出入肾动静脉及输尿管,分离出肾脏,4%多聚甲醛和液氮速冻保存备用。分别采用HE、Masson染色观察组织形态、胶原蛋白等变化;免疫组化观察MCP-1和巨噬细胞(CD68)表达;Western blot检测p-p38MAPK、p38MAPK、TGF-β1蛋白表达,RT-PCR检测TNF-αmRNA、IL-6 mRNA等的表达。结果与正常组比较,模型组MCP-1和CD68巨噬细胞阳性计数明显增加(p<0.05),p-p38MAPK、TGF-β1蛋白及TNF-αmRNA、IL-6mRNA表达明显增高(p<0.05);与模型组比较,复肾功方各组MCP-1和CD68巨噬细胞阳性计数依次减少(p<0.05),p-p38MAPK、TGF-β1蛋白及TNF-α、IL-6mRNA表达明显降低(p<0.05)。结论复肾功方能有效改善慢性肾衰竭大鼠肾间质炎性细胞浸润和相关炎症因子的表达,从而减轻肾组织炎症反应,延缓CRF进展,其干预机制可能与抑制p38MAPK信号转导通路的激活、减少下游相关细胞因子MCP-1、TGF-β1等的表达有关。
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