皮肤作为体表的屏障易因热、化学因素、机械因素的作用而受到损伤。及时用敷料覆盖和保护,是治疗创面的基本手段。抑制细菌繁殖、防止创面感染,是加速创面愈合的关键。蚕丝丝素蛋白(SF)具有良好的生物相容性,用作创面敷料有广阔的开发、应用前景。聚六亚甲基双胍(PHMB)作为一种新型的环保抗菌剂,广谱抗菌能力强。本文以研制新型抗菌丝素创面敷料为目的,研究带负电荷的丝素蛋白与带正电荷的PHMB的相互作用,以及PHMB对SF分子构象的影响;采用共混-冷冻干燥法制备载PHMB的丝素蛋白多孔材料,探讨多孔材料内PHMB的释放规律,以及PHMB的装载量与抑菌效果之间的关系;进一步用吸附-二次冻干法制备载PHMB的丝素多孔材料,探讨其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果。首先,制备不同质量比的PHMB/SF共混溶液。发现当在带负电荷的丝素蛋白溶液中混入较少量带正电荷的PHMB(占丝素质量1%或2%)时,溶液内丝素蛋白的粒径有所增大,未聚集产生沉淀;而当在丝素溶液中混入占丝素质量5%的PHMB时,体系内颗粒的表面Zeta电位升高至+0.68±0.4m V,颗粒间相互聚集产生大量的絮状沉淀。SEM观察结果表明,该沉淀物内部呈多孔网状结构,并含大量片状物。圆二色光谱、红外吸收光谱和X-射线衍射的测试和分析结果表明,在丝素溶液中混入较少量PHMB(1%或2%)后,或混入大量PHMB(10%)后,溶液内丝素蛋白的分子构象均未发生显著变化,仍以无规卷曲结构为主。而当在丝素溶液中混入占丝素质量5%的PHMB,产生的絮状沉淀物中明显产生β-折叠结构,而上清液中含有少量的α-螺旋型结构。其次,采用共混-冷冻干燥法制备PHMB/SF抗菌多孔材料。从扫描电子显微镜观察结果可见,混入PHMB后,丝素多孔材料内部的孔径未发生明显变化,未产生明显的相分离,但材料内孔壁上新增部分微米级小孔。红外吸收光谱和X-射线衍射的测试和分析结果表明,PHMB/SF多孔材料中,丝素的二级结构主要为β-折叠结构。采用紫外-可见分光光度计检测PHMB的释放,结果表明,当PHMB/SF质量比较小时(0.5-2%),载入多孔材料内部的PHMB难以充分释放,20d的累积释放量大约在10-20%;当PHMB/SF质量比较大时(5-20%),PHMB的释放量显著增多,20d的累积释放量大约在40-75%。抑菌圈和抑菌率实验结果表明,PHMB/SF多孔材料对金黄色葡萄球菌的抑菌能力强于对大肠杆菌的抑菌能力。当PHMB/SF质量比为2%时,对两种实验菌种都具有抑菌作用;当PHMB/SF质量比达到5%及以上时,能杀灭99%的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌。最后,采用冻干法制得的丝素多孔材料浸渍于PHMB溶液内吸附PHMB,经二次冷冻干燥后制得载PHMB的丝素多孔材料。抑菌圈和抑菌率测试结果表明,当PHMB的浸渍浓度为0.005wt%时,PHMB/SF质量比约为0.5%,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有抑菌效果;当PHMB浸渍浓度为0.02wt%时,PHMB/SF质量比约2%,对两种测试菌种的抑菌率均达99%以上,抗菌效果显著。采用浸渍法制备的载PHMB的丝素多孔材料虽需进行二次冻干,但其短期抗菌效果强于用共混法制备的PHMB/SF丝素多孔材料。