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粘细菌(myxobacteria)是一类具有复杂多细胞群体行为的革兰氏阴性菌,分类上属于变形杆菌门(Proteobacteria)的δ分支。粘细菌可以滑行运动,具有捕食特性,能产生结构新颖、种类繁多、作用机制多样的生物活性代谢产物,在农业、医药、工业等方面具有重要研究和应用价值。粘细菌是筛选天然产物的重要资源,己成为继放线菌后的第二大类药源开发菌,从粘细菌代谢产物中寻找抗肿瘤药物先导分子已经成为微生物医药技术领域研究的热点。本文采用灭活大肠杆菌诱导子实体法和滤纸片诱导子实体法,从我国各地采集的土样中分离纯化得到8株粘细菌,对筛选得到的粘细菌进行子实体和菌落形态观察,对其进行初步归类,初步鉴定这些粘细菌分属于2个属,分别为粘球菌属5株,纤维堆囊菌属3株。分离纯化的粘细菌中,对抗肿瘤生物活性较高的STXZ77菌株,结合形态观察、生理生化特征及16SrRNA基因序列同源性分析等一系列细菌鉴定方法,鉴定并归类STXZ77菌株为Myxococcus stipitatus STXZ77,丰富了粘细菌菌种资源,为微生物次级代谢物的挖掘奠定了基础。通过肿瘤细胞毒性试验研究了 STXZ77菌株的体外抗肿瘤生物活性,其发酵上清液对B16、HCT-16细胞具有高效的抑制效果。对发酵上清液利用温度梯度处理后进行肿瘤细胞毒性实验,结果表明发酵液上清在大于60℃C处理30 min后,失去抗肿瘤活性,发酵液上清中的主要活性物质具有热不稳定性。利用硫酸铵分级沉淀提取发酵上清液中的蛋白,检测各饱和度区间沉淀蛋白的肿瘤细胞毒性,结果显示,40%～60%饱和度区间的细胞毒性最强,80%～100%饱和度区间的细胞毒性最弱。将发酵液上清经80%饱和度硫酸铵沉淀,透析除盐,得到抗肿瘤蛋白粗提物,再经阴离子交换色谱对抗肿瘤蛋白粗提物初步分离。XAD-16大孔吸附树脂吸附STXZ77菌株发酵液上清,经甲醇解吸附得到XAD-16树脂粗提物。CCK-8法检测XAD-16树脂粗提物对多种细胞的抑制率,结果表明,STXZ77菌株发酵产物XAD-16树脂粗提物对B16、4T1、SMMC-7721、HeLa、SW480等多种肿瘤细胞具有较好的细胞毒性,作用24h后的IC50值分别为5.34μg/mL、13.50μg/mL、11.93 μg/mL、28.70 μg/mL、48.09 μg/mL,而对正常细胞HUVEC 的毒性较小,IC50 值为 17.09μg/mL,小于 B16、4T1 及 SMMC-7721细胞。利用HPLC对XAD-16树脂粗提物中的抗肿瘤活性组分进行分离,得到四个抗肿瘤活性组分AP-A,AP-B,AP-C,AP-D。对组分AP-C进行质谱分析,其阳离子ESI-MSm/z422.99[M+H]+,为寻找抗肿瘤药物先导分子提供了重要资源,为以后该物质修饰后作为抗肿瘤药物提供重要依据。STXZ77菌株具有重要的抗肿瘤药物开发利用潜在价值。