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昼夜节律是机体调节自身生理活动和行为来适应环境的近24小时的周期性变化。昼夜节律的调节方式是由正调控元件和负调控元件组成的转录/翻译负反馈环路。除此之外,昼夜节律还受到其他许多因素调控,其中最重要的一个因素就是能量代谢,但是能量代谢影响昼夜节律的分子机制尚不清楚。我们通过酵母双杂交技术筛选发现LIPIN1与BMAL1分子之间存在相互作用。LIPIN1蛋白参与脂质合成和能量代谢。本研究拟进一步研究LIPIN1在昼夜节律和能量代谢中的作用,探讨能量代谢影响昼夜节律的可能通路。目的：阐明LIPIN1在昼夜节律中的作用；研究LIPIN1是否介导了能量代谢对昼夜节律的调节。方法：通过免疫沉淀验证LIPIN1和BMAL1的相互作用；通过GSTpull down的方法寻找LIPIN1与BMAL1, CLOCK相互作用的结合域；通过荧光素酶报告系统研究LIPIN1对BMAL1, CLOCK的功能的影响；通过构建LIPIN1的突变体,检测萤光素酶活性,寻找LIPIN1对BMAL1, CLOCK的功能影响的结构域；通过免疫荧光共定位寻找LIPIN1在细胞中发挥影响BMAL1, CLOCK功能的可能性原因的解释。通过LIPIN1基因敲除小鼠的行为学实验,研究LIPIN1对昼夜节律的作用；通过实时定量荧光PCR研究LIPIN1敲除后对时钟基因表达的影响。结果：LIPIN1与BMAL1、CLOCK之间存在相互作用,LIPIN1b的C端是其与BMAL1、CLOCK相互作用的重要结构域。在小鼠肝脏中,LIPIN1与BMAL1的相互作用具有昼夜节律性,在CT8-CT16最高。LIPIN1可以剂量依赖性地抑制CLOCK/BMAL1的转录活性。其可能的作用机制是促进BMAL1从细胞核转移到细胞质中。LIPIN1基因敲除小鼠肝脏中一些CLOCK/BMAL1靶基因表达的昼夜节律出现变化,主要表现为CT9的表达量比野生型小鼠高。白天进食可以逐步逆转小鼠肝脏的节律基因表达,而这种改变在LIPIN1基因敲除小鼠中变缓。LIPIN1在果蝇神经系统的表达呈现昼夜节律。干扰果蝇神经系统的LIPIN1导致昼夜节律行为和时钟基因表达出现异常。结论：我们的研究表明,LIPIN1可以偶联能量代谢和昼夜节律,使机体的能量代谢和昼夜节律协调一致。