赤斑羚(N.baileyi)又名红斑羚,属于偶蹄目(Artiodactyla)牛科(Bovidae)羊亚科(Caprinae)斑羚属(Naemorhedus),国家一级保护动物,被IUCN评定为易危级别,被CITES收录于附录1。野生赤斑羚分布区域狭窄,种群数量稀少,而圈养赤斑羚目前只存在于上海动物园,对赤斑羚开展系统性研究的难度极大。上海动物园圈养赤斑羚个体数量12只,且适宜繁育个体数量仅为3只(2雄1雌),还存在种群内性别比例严重失衡的问题,近年来已出现个体数量下降趋势。为了提高赤斑羚繁育率,扩大种群内个体数量,需要采取科学的辅助措施提高配对成功率。以往通过人工观察赤斑羚发情行为进行合笼配对的方式较为主观,不仅打乱了原本赤斑羚应有的发情期节律,极端情况下还可能导致不必要的打斗伤亡。粪便中生殖激素的含量测定能较为客观地反映个体的发情状态,是一种理想的发情期预测方式。因此,我们希望建立一种连续采样,有效保存并测定粪便样本中生殖激素含量的方式,结合传统的人工观察,客观准确地预测其发情期,保证合笼有效性,减轻圈养赤斑羚心理和生理的伤害。在某些野外条件或者圈养条件下,会出现无法及时处理样本的情况,寻找一种良好的保存方式是进行粪便激素研究的先决条件之一。对于多种动物粪便样本的研究表明,不同保存时间和保存方式会导致其粪便激素水平呈现很大差异。因此,针对赤斑羚进行粪便内激素水平时效性研究就显得至关重要。本实验试图评估不同贮存方法对粪便激素时效性的影响,五种贮存方法分别为:(1)不进行任何处理、(2)95%无水乙醇、(3)乳酸左氧氟沙星抗生素、(4)50℃烘箱干燥、(5)-20℃冰柜冷冻,除冷冻处理外其余各组均为室温条件。同时,我们采用四个时间梯度(15d、30d、90d和150d)检验粪便中雌二醇、孕酮、睾酮的含量随着贮存时间延长而发生的变化。结果表明,不同激素的最佳保存方法并不相同。雌二醇可以采用除抗生素外的其余四种方式,其中乙醇为短效储存(<30d),最优选择为干燥或冷冻;孕酮可以采用除抗生素外的其余四种方式,最优选择为冷冻;睾酮可以采用除抗生素外的其余四种方式,其中冷冻为短效储存(<30d),最优选择为不处理。在实际处理时可依据实验条件及仪器灵活对待。对于赤斑羚发情期的预测,本研究收集了上海动物园两只育龄赤斑羚(1雌1雄)2018和2019年的部分粪便样本,对雌性赤斑羚粪便进行雌二醇和孕酮两种生殖激素含量测定,对雄性赤斑羚粪便进行生殖激素睾酮的含量测定,绘制曲线图观察其生殖激素年度波动状况,合理推测发情期从而辅助判断合笼时机。根据雌二醇浓度年波动状况合理预测雌性赤斑羚发情期在1月中后期、11月末至12月中旬两个时间段。根据孕酮浓度年波动状况合理预测雌性赤斑羚发情期在1月初期、1月末期、11月初至12月中旬三个时间段。综合判断雌性赤斑羚预测发情期为1月末及12月中旬这两个时间段。根据睾酮浓度年波动状况合理预测雄性赤斑羚发情期在1月初至3月初且1月中旬前期更强烈、4月中至5月中、10月中至11月中后期三个时间段。理想条件下,1月末、11月末这两个时期同时是雌雄赤斑羚的发情期,理论上在此时期进行合笼成功率最高。由于现实条件下存在大量不确定性,在实际生产生活中,可采取扩大合笼时间与观察发情行为两者结合的方式能最大程度上在既保证赤斑羚安全的前提下尽可能提高繁育率。