论文部分内容阅读
目的:通过检测Annexin A1(ANXA1) mRNA及蛋白在卵巢癌紫杉醇耐药与敏感细胞及组织中的表达,探讨ANXA1与卵巢癌紫杉醇耐药之间的关系,寻找预测卵巢癌紫杉醇耐药的指标及为临床上逆转卵巢癌紫杉醇耐药提供理论及实验依据。方法:1.采用MTT法检测卵巢癌紫杉醇敏感细胞系(SKOV3),耐药细胞系(SKOV3/Taxol-25)的紫杉醇半数抑制浓度(IC50)及耐药指数(RI)。2.在前期研究基础上(蛋白质组学技术比较SKOV3/Taxol-25和SKOV3的蛋白质表达的差异,发现ANXA1蛋白在SKOV3/Taxol-25中表达明显下调,提示ANXA1蛋白表达下调可能与卵巢癌紫杉醇耐药相关),采用Western blot及Real Time-PCR (RT-PCR)检测SKOV3/Taxol-25及SKOV3中ANXA1蛋白及mRNA的表达。3.采用回顾性研究的方法,选择同期手术切除的组织标本,卵巢癌紫杉醇耐药者20例(耐药组),敏感者22例(敏感组),免疫组化法检测ANXA1蛋白在两组患者卵巢癌组织中的表达,分析ANXA1蛋白的表达与卵巢癌临床病理特征的关系。结果:1.MTT结果显示:SKOV3/Taxol-25耐药性良好,此细胞株可以进行后续实验。2.Western blot及RT-PCR结果显示:ANXA1蛋白及mRNA在SKOV3/Taxol-25中的表达低于SKOV3中的表达,差异有统计学意义(p<0.05)。3.免疫组化结果显示:耐药组和敏感组ANXA1蛋白表达阳性率分别为70%和95.5%,两者比较差异有统计学意义(p<0.05);在卵巢癌组织中,ANXA1蛋白的阳性表达与卵巢癌组织类型、病理分级无关(p>0.05),而与临床分期相关(p<0.05);26例低分化卵巢癌中,耐药组与敏感组ANXA1蛋白阳性表达率分别为72.7%(8/11)及93.3%(14/15)(p>0.05)。结论:1. ANXA1蛋白在卵巢癌紫杉醇耐药细胞及组织中的表达均明显低于敏感细胞及组织,提示ANXA1蛋白的低表达可能与卵巢癌紫杉醇耐药相关,检测ANXA1蛋白的表达水平可能对预测卵巢癌患者对紫杉醇的敏感性有一定的指导意义。2. ANXA1蛋白的表达与卵巢癌的临床分期相关,随着临床分期升高,ANXA1表达下调,提示ANXA1蛋白的表达下调可能参与卵巢肿瘤细胞的侵袭转移。