基于电化学生物传感器的结核分枝杆菌特异性抗原的检测新方法研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:changjian200910
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目的结核病是由结核分枝杆菌所致的传染性疾病,对全球卫生系统造成了极大的负担。结核病的早期诊断对疾病的治疗和传染的控制尤其重要,而当前的实验室检测手段各有不足,无法满足临床需求。电化学生物传感器价格低廉、操作简便,能对靶标进行快速而准确的检测。本研究旨在应用新型电化学生物传感器检测结核分枝杆菌特异性抗原MPT64,为结核病的诊断提供一种新的方法。方法本研究首次合成了蒽醌衍生物蒽醌-2-羧酸(AQCA,Anthraquinone-2-carboxylic acid)与有序介孔碳CMK-3所形成的复合纳米材料,并将其作为生物分子电化学信号响应及放大材料,然后以海胆状铈基金属有机框架与金纳米粒子复合物作为传感界面,通过适体识别系统构建了夹心型电化学生物传感器,用于结核分枝杆菌特异性抗原MPT64的检测。在合成各纳米材料后,采用多种方法对纳米材料结构进行了表征,以证明纳米材料的成功合成。在构建该电化学生物传感器时,采用循环伏安法和电化学阻抗谱验证了该生物传感器的各步骤是否构建成功。之后,优化了实验中对生物传感器检测性能有影响的数个关键因素,采取最佳实验条件构建生物传感器。然后,利用不同浓度的MPT64抗原溶液测量了生物传感器检测的线性范围和检测限,探究了该生物传感器的重复性和稳定性,并采用多种干扰物质评价其特异性。之后,采用加标回收实验考察了生物传感器在血清基质中检测MPT64抗原的可行性。此外,我们还收集了结核病患者和健康人的血清标本,应用生物传感器对其进行了检测,初步探究了该生物传感器临床应用的可行性。结果本研究成功构建了电化学生物传感器。该新型电化学生物传感器在对结核分枝杆菌MPT64抗原的检测中呈现出优异的信号响应,其检测限为67.6 fg m L-1,线性范围宽(100 fg m L-1-10 ng m L-1),具有良好的选择性、重现性和稳定性。血清基质加标回收实验的回收率和相对标准偏差分别在87.3%~109.9%和3.60%~9.49%之间。此外,构建的生物传感器在人血清样本MTP64抗原的检测中也展现出了良好的特异性(93.3%)和灵敏度(86.7%)。结论本研究成功构建了新型电化学生物传感器,并实现了对结核分枝杆菌特异性抗原MPT64的检测,其优良的检测性能以及人血清标本检测结果表明该电化学生物传感器有望作为一种新的检测方法用于结核病的诊断。
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