目的:研究nesfatin-1对小鼠三叉神经痛的影响及其胞内机制研究。方法:通过急性分离与原代培养小鼠三叉神经元,利用全细胞膜片钳的方法探究nesfatin-1对A-型钾通道的作用。利用western blot方法检测nesfatin-1受体的表达。利用免疫荧光检测作用受体的分布情况。利用全细胞膜片钳的方法检测nesfatin-1对小鼠三叉神经元兴奋性的影响,运用Von Frey的方法在行为学层面测试nesfatin-1对小鼠面部痛阈值的影响。探究nesfatin-1的受体促肾上腺皮质激素释放因子1型受体(以下简称CRFR1)在小鼠三叉神经痛中的调节作用。结果:本项研究结果表明(1)1 nM的nesfatin-1对小鼠三叉神经元A-型钾通道的抑制率达到了 28.9±1.3%,在随后的的电生理记录中,我们发现这种抑制作用有明显的浓度依赖性。(2)Nesfatin-1的抑制作用可被GDP-β-S(特异性G蛋白活性抑制剂)、NBI27914(CRFR1特异性阻断剂)、蛋白激酶A(PKA)的选择性阻断剂PKI6-22和另一种PKA阻断剂H-89所阻断;而蛋白激酶C(PKC)的选择性抑制剂GF109203X无法阻断nesfatin-1对小鼠三叉神经元A-型钾电流的抑制作用。(3)Western blot和免疫荧光的实验检测发现CRFR1主要表达分布在中小直径的三叉神经元中。(4)Nesfatin-1能够显著提高其放电频率,而NBI27914能阻断该效应。(5)对小鼠进行面部注射nesfatin-1(2.0μg/kg)可诱导小鼠机械痛敏。(6)在CFA(完全弗氏佐剂)模型的小鼠三叉中的CRFR1表达量明显升高,并且阻断剂NBI27914可缓解由CFA造成的三叉神经痛。结论:Nesfatin-1首先作用于CRFR1,进而激活PKA,随后磷酸化JNK来抑制A-型钾通道,并且这种抑制作用具有浓度依赖性。此外,nesfatin-1能够增强小鼠三叉神经元的放电频率,从而起到降低小鼠面部机械痛阈值的作用,并且其作用受体CRFR1在面部炎性痛模型中表达也有所增加。