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啤酒中的泡沫活性蛋白是啤酒泡沫产生的关键因素之一,混浊敏感蛋白是引起啤酒稳定性下降的主要因素之一。目前,仍然没有一种高效特异的方法检测泡沫活性蛋白和混浊敏感蛋白。为探索一种能快速而有效检测啤酒中泡沫活性蛋白Z4和混浊敏感蛋白的方法,本研究分别利用(NH4)2SO4分级沉淀泡沫活性蛋白Z4和硅胶吸附混浊敏感蛋白,用葡聚糖凝胶层析柱对粗提的两种蛋白进行纯化,并分析了两种蛋白的氨基酸含量,以及用聚丙烯酰胺凝胶电泳和质谱进行鉴定。利用得到的高纯度泡沫活性蛋白Z4和混浊敏感蛋白免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术建立了两株能分泌抗泡沫活性蛋白Z4和抗混浊敏感蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为:D1H8和G2H9;C6B7和E10D7,并制备出了对应的单克隆抗体。间接酶联免疫法测定抗体(腹水)的效价均在106以上,两种蛋白的交叉反应率均较低,表现出很高的特异性。在此基础上,通过对包被条件、洗涤次数、封闭时间、工作浓度等因素的筛选比较,优化了测定泡沫活性蛋白Z4和混浊敏感蛋白ELISA方法的条件。优化结果显示:S-BA-ELISA法测定泡沫活性蛋白Z4最佳包被缓冲液为0.05M pH8.0 PBS,最佳抗体包被条件为4℃过夜,浓度为10mg/L;生物素标记单抗最适浓度为5mg/L;最佳底物显色时间为15min。双抗体夹心法测定混浊敏感蛋白抗体最佳包被浓度为15mg/L;BSA封闭时间为120min;二抗(兔抗)最适浓度为10mg/L,最适孵育时间为60min;最佳显色时间为15min。泡沫活性蛋白Z4的浓度在43～125μg/L时,线性相关性较高,线性回归方程为Y=3.6876·Lg[X]-5.2818(R2=0.963,n=8),5个样本重复测定5次结果变异系数均小于20%,结果较为可靠。用所建立的双抗体夹心法测定混浊敏感蛋白与泡沫活性蛋白Z4没有交叉反应且有较好的重复性。