【摘 要】
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羌活（Notopterygium incisum Ting ex H.T.Chang）属于伞形科（Umbelliferae）羌活属（Notopterygium）多年生草本植物,其干燥的根和根茎入药,为我国特有的传统中药材,具有解表散寒、祛风除湿、止痛等功效。羌活生长在气候寒冷的高海拔地区,种子萌发率低,种群更新缓慢。由于其巨大的经济价值,野生羌活遭到了人们的大量采挖,野生资源遭到破坏,生境大面积丧
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羌活（Notopterygium incisum Ting ex H.T.Chang）属于伞形科（Umbelliferae）羌活属（Notopterygium）多年生草本植物,其干燥的根和根茎入药,为我国特有的传统中药材,具有解表散寒、祛风除湿、止痛等功效。羌活生长在气候寒冷的高海拔地区,种子萌发率低,种群更新缓慢。由于其巨大的经济价值,野生羌活遭到了人们的大量采挖,野生资源遭到破坏,生境大面积丧失,目前物种具有面临灭绝的危险。为了缓解羌活资源危机和市场供需问题,本文以羌活的种子为实验材料,探究施加不同浓度的赤霉素（GA3）和油菜素内酯（BR）以及不同层积方式对解除羌活种子休眠的作用。同时,利用植物组织培养的方法,收集萌发失败的种子以及采集其他不同的外植体,通过外植体的筛选和无菌体系的建立、以种子和根状茎上的幼芽为外植体的器官直接发生途径和以叶片为外植体的器官间接发生途径等,对构建羌活快繁体系进行了研究,主要研究结果如下:1.种子解除休眠:羌活种子先在25℃湿沙层积30 d,后转入4℃湿沙层积30 d,以此为周期层积6个月后,种子可以萌发。单独使用油菜素内酯的效果比赤霉素好,当油菜素内酯的浓度为0.5 mg/L时,解除休眠的效果最好,种子的萌发率为40%。2.外植体的筛选和无菌体系的建立:本研究筛选的外植体为种子、幼芽和叶片。研究结果表明,叶片最佳消毒条件为75%酒精10 s+0.1%升汞3 min,染菌率最低为2.86%;种子最佳消毒条件为不带外种皮+75%酒精20 s+0.1%升汞9 min,染菌率最低为9.52%;幼芽最佳消毒条件为2 g/L多菌灵震荡2 h+75%酒精60 s+0.1%升汞15 min,染菌率最低为13.89%。3.以种子为外植体的器官直接发生途径:收集种子解除休眠实验中萌发失败的种子,经过消毒处理后,在种子一侧边缘约1/3处切除部分种子作为外植体。其最适萌发的培养基为MS+0.1 mg/L BR+8 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,最佳培养温度为16±2℃,羌活种子无菌萌发的萌发率最高为70.48%;最适丛生芽诱导的培养基为1/2 MS+1.5 mg/L6-BA+0.6 mg/L IBA+0.2 mg/L GA3+8 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,丛生芽的诱导率为25.71%,丛生芽增殖系数为5.06;最适生根培养基为1/2 MS+0.4 mg/L NAA+8 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,生根率为60%,平均根长为1.51 cm,平均根数为4.15条;以营养土为基质,进行炼苗,一个月后组培苗的成活率为95.80%。4.以幼芽为外植体的器官直接发生途径:以幼芽为外植体,其最适丛生芽诱导的培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.2 mg/L GA3+8 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,诱导率为36.11%,在后续的增殖培养过程中,组培苗染菌严重且无法根除。生根培养的培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.2 mg/L GA3+0.5 g/L活性炭+8 g/L琼脂+30g/L蔗糖。5.以叶片为外植体的器官间接发生途径:以叶片为外植体,其最适愈伤组织诱导的培养基为MS+3.0 mg/L NAA+2.0 mg/L TDZ+8 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,诱导率为80%,褐化率为4.74%;最适愈伤组织出芽的培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.2mg/L GA3+0.5 g/L活性炭+8 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,诱导率为96.16%,褐化率为15.24%;最佳生根培养基为1/2 MS+0.6 mg/L NAA+8 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,平均根数为4.41条,平均根长为0.43 cm;以营养土为基质,进行炼苗,一个月后组培苗的存活率为97.57%。
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