论文部分内容阅读
研究背景与目的
糖尿病是人类高发疾病,目前我国已成为糖尿病患者最多的国家。糖尿病常伴血脂异常,若体内糖脂代谢的紊乱得不到控制将出现全身广泛的微血管和大血管病变,进而出现脑中风等并发症。补阳还五汤本是传统治疗中风和中风后遗症的中医名方,临床常应用于脑中风及其他神经血管疾病。现代医学发现补阳还五汤具有调节血糖和降脂的作用,但补阳还五汤对糖尿病的疗效及具体作用机制相对较少。本研究采用高脂饮食联合小剂量STZ注射的方法制造2型糖尿病模型大鼠。我们评估补阳还五汤对糖尿病大鼠的血糖、血脂水平和血清胰岛素的调节作用,同时使用Westernblot分析检测糖尿病大鼠肝脏糖脂代谢相关蛋白IRS-1、AKT2、S6K1和SREBP-1的表达水平,从而探究补阳还五汤调节糖尿病糖脂代谢的机制。
方法
4周龄的雄性SD大鼠,依照完全随机的原则分为七组:空白组(Blank)、高脂组(Fat)、糖尿病模型组(DM)、补阳还五汤高剂量组(High)、补阳还五汤低剂量组(Low)、二甲双胍组(DMBG)、阿托伐他汀组(LLD)。我们对相应的组进行为期四周的高脂饮食和小剂量STZ注射制造糖尿病模型大鼠,其后再进行药物干预四周。造模和给药期间,进行尾尖和尾静脉采血检测血糖、血脂水平。于药物干预四周后取材。HE染色法观察肝脏组织形态;比色法测定血清TC、TG、HDL-C和LDL-C;Elisa法测血清胰岛素;利用Westernblot分析测定IRS-1、AKT2、S6K1和SREBP-1的蛋白表达水平。
结果
1.采用高脂饮食结合小剂量STZ注射制作糖尿病模型大鼠,大鼠的随机血糖高于16.7mmol/L,其血脂与Blank组和Fat组存在明显差异,符合糖尿病模型大鼠。
2.与DM组相比,Low组大鼠的随机血糖下降,血清中TC、TG、LDL-C以及胰岛素的水平也出现降低,而DMBG组则只出现TC、TG的降低,血糖并没有明显降低。HE染色结果显示给药各组与DM组的肝脏切片在组织形态学上未见明显差异。
3.WB分析结果显示,与DM组相比,High组、Low组、DMBG组的AKT2蛋白表达显著上升,而LLD组反而下降;与DM组相比,High组、Low组、DMBG组以及LLD组的IRS-1蛋白表达均显著下降;与DM组相比,Low组、DMBG组的S6K1蛋白表达显著上升,而High组、LLD组反而下降;与DM组相比,Low组和LLD组的SREBP-1蛋白表达显著下降了。
结论
1.补阳还五汤对高脂喂养联合小剂量STZ注射造成的糖尿病大鼠具有治疗效果,能够降低模型大鼠随机血糖的水平,降低其血清甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的水平。
2.补阳还五汤通过下调IRS1,并增加AKT2的表达来调节糖尿病的糖代谢。
3.补阳还五汤通过下调IRS1和上调AKT2,来减少S6K1的表达,进而使成熟的SREBP-1减少,起到了调节糖尿病脂代谢的作用。
糖尿病是人类高发疾病,目前我国已成为糖尿病患者最多的国家。糖尿病常伴血脂异常,若体内糖脂代谢的紊乱得不到控制将出现全身广泛的微血管和大血管病变,进而出现脑中风等并发症。补阳还五汤本是传统治疗中风和中风后遗症的中医名方,临床常应用于脑中风及其他神经血管疾病。现代医学发现补阳还五汤具有调节血糖和降脂的作用,但补阳还五汤对糖尿病的疗效及具体作用机制相对较少。本研究采用高脂饮食联合小剂量STZ注射的方法制造2型糖尿病模型大鼠。我们评估补阳还五汤对糖尿病大鼠的血糖、血脂水平和血清胰岛素的调节作用,同时使用Westernblot分析检测糖尿病大鼠肝脏糖脂代谢相关蛋白IRS-1、AKT2、S6K1和SREBP-1的表达水平,从而探究补阳还五汤调节糖尿病糖脂代谢的机制。
方法
4周龄的雄性SD大鼠,依照完全随机的原则分为七组:空白组(Blank)、高脂组(Fat)、糖尿病模型组(DM)、补阳还五汤高剂量组(High)、补阳还五汤低剂量组(Low)、二甲双胍组(DMBG)、阿托伐他汀组(LLD)。我们对相应的组进行为期四周的高脂饮食和小剂量STZ注射制造糖尿病模型大鼠,其后再进行药物干预四周。造模和给药期间,进行尾尖和尾静脉采血检测血糖、血脂水平。于药物干预四周后取材。HE染色法观察肝脏组织形态;比色法测定血清TC、TG、HDL-C和LDL-C;Elisa法测血清胰岛素;利用Westernblot分析测定IRS-1、AKT2、S6K1和SREBP-1的蛋白表达水平。
结果
1.采用高脂饮食结合小剂量STZ注射制作糖尿病模型大鼠,大鼠的随机血糖高于16.7mmol/L,其血脂与Blank组和Fat组存在明显差异,符合糖尿病模型大鼠。
2.与DM组相比,Low组大鼠的随机血糖下降,血清中TC、TG、LDL-C以及胰岛素的水平也出现降低,而DMBG组则只出现TC、TG的降低,血糖并没有明显降低。HE染色结果显示给药各组与DM组的肝脏切片在组织形态学上未见明显差异。
3.WB分析结果显示,与DM组相比,High组、Low组、DMBG组的AKT2蛋白表达显著上升,而LLD组反而下降;与DM组相比,High组、Low组、DMBG组以及LLD组的IRS-1蛋白表达均显著下降;与DM组相比,Low组、DMBG组的S6K1蛋白表达显著上升,而High组、LLD组反而下降;与DM组相比,Low组和LLD组的SREBP-1蛋白表达显著下降了。
结论
1.补阳还五汤对高脂喂养联合小剂量STZ注射造成的糖尿病大鼠具有治疗效果,能够降低模型大鼠随机血糖的水平,降低其血清甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的水平。
2.补阳还五汤通过下调IRS1,并增加AKT2的表达来调节糖尿病的糖代谢。
3.补阳还五汤通过下调IRS1和上调AKT2,来减少S6K1的表达,进而使成熟的SREBP-1减少,起到了调节糖尿病脂代谢的作用。