DNA凝聚的多因素调控

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DNA凝聚取决于许多因素,包括聚电解质的价态和浓度、溶液的pH值和介电特性等。在本研究中,我们用原子力显微镜(AFM)、动态光散射(DLS)及单分子磁镊(MT)技术研究了导致DNA凝聚、解凝聚及DNA电荷中和现象的影响因素及不同因素的相互作用情况。主要包括:1、介电常数在离子与DNA作用后的电荷中和中起着重要作用。用DLS系统研究了介电常数的改变对一价、二价离子作用后的DNA电荷中和的调控(通过添加6-氨基己酸(6-A)和乙醇来调节溶液的介电常数)。我们发现,在一价、二价离子存在下,随着介电常数的增大(添加0.25M 6-A),DNA的电泳迁移率减小;相反降低溶液的介电常数(添加不同摩尔体积分数的乙醇),DNA的电泳迁移率逐渐增大。可见介电常数的增大对DNA电荷中和具有抑制作用,介电常数的降低对DNA电荷中和具有促进作用,并且乙醇的摩尔体积分数越大,促进作用越强。同时在相同的介电常数下,Na+与Mg2+(5m M)作用后的DNA迁移率之比约为2:1,该结果和曼宁平衡理论相符。2、介电常数和pH值对DNA凝聚有调控作用。用AFM、DLS、MT研究了介电常数与pH值对Mg2+导致的DNA凝聚的调控(介电常数调节如上)。我们发现,随着Mg2+—DNA溶液中pH的减小和介电常数的降低,DNA凝聚都随之增强,而且其凝聚效果比只降低pH值或介电常数引起的凝聚要强,可见pH值和乙醇对Mg2+导致的DNA凝聚有协同作用。而且在乙醇与pH值共同引起的DNA凝聚体里添加两性离子6-A时,有解凝聚现象出现(凝聚程度减弱),可见乙醇和6-A两者对Mg2+导致的DNA凝聚具有拮抗作用。用MT、AFM及DLS进一步证实了上面的结果,DNA凝聚力和凝聚程度随着Mg2+—DNA溶液pH的减小和介电常数的降低而变大变强;同时增加溶液的介电常数,DNA的凝聚力及凝聚强度则变小变弱。DNA的迁移率随着Mg2+—DNA溶液pH的减小和介电常数的降低而增大,但始终为负。
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