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目的本研究拟以核磁共振氢谱(1H nuclear magnetic resonance,1HNMR)技术为基础,建立UW保存液代谢组学实验方法,探讨其在移植供肝质量和功能评估中新思路。方法SD大鼠20只,低温UW保存液灌注后,获取大鼠肝脏,建立移植供肝单纯低温保存模型,根据肝脏保存的不同时间(0h、4h、8h、12h)分为4个组,测定各个时间点(0h,4h,8h,12h)核磁共振氢谱,利用主成分分析法(principal component analysis, PCA)和偏最小二乘法判别式分析(partial least square discriminant analysis, PLS-DA)对核磁波谱数据进行多元统计分析,分析结果以两个主成分(principal component, PC)t[1]/t[2]进行作图(即得分图,scores plot),显示样本间因代谢差异导致的分布和差异状况,与之相应的载荷图(loading plot)显示导致这些差异的主要代谢物。统计学采用SPSS17.0对四组保存液样本代谢物的归一化积分值进行单因素方差分析(ANOVA), P<0.05认为差异具有统计学意义。结果1.对0、4、8、12h的UW保存液进行PCA分析,大鼠肝脏与体重的脏器系数比中的2号(最小值)和15号(最大值)未出现规律性的离群,表明可以排除脏器系数差异对多元统计分析造成的影响。2.样本中代谢产物波谱发生了显著变化,其中保存后4h内的代谢物质变化最大;与0h相比,在4h、8h、12h组中腺苷、别嘌呤醇、乳糖酸、棉子糖持续减少;而次黄苷、次黄嘌呤、乳酸、琥珀酸盐、丙氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、胆碱、乙醇、氧化三甲胺/甜菜碱、磷酸胆碱/甘油磷酸胆碱、葡萄糖等显著升高;而谷胱甘肽变化则不太明显。3.利用1HNMR结合PCA和PLS-DA分析的模式识别对20例UW保存液样本中的代谢产物进行分析,Oh与4h、0h与8h、Oh与12h、4h与8h、4h与12h的PCA交叉验证得分图和相关因子载荷图;8h与12h以及后三组间(4h、8h、12h)和四组间(Oh、4h、8h与12h)的PLS-DA交叉验证得分图和相关因子载荷图显示,不同时间点的UW保存液样本可以在得分图中较好地区分开;组间数据的差异与两个主成分都相关,各时间点各自集中分布,无明显的交叉和重叠。造成组间差异的物质如下所述,与0h相比,在4h、8h、12h组中腺苷、别嘌呤醇、乳糖酸、棉子糖等明显减少,且随着肝脏保存时间的延长,这些物质的量逐渐减少;而次黄苷、次黄嘌呤、乳酸、琥珀酸盐、丙氨酸、胆碱、谷氨酸、谷氨酰胺、乙醇、氧化三甲胺/甜菜碱、磷酸胆碱/甘油磷酸胆碱、葡萄糖等随着肝脏保存时间的延长显著升高。结论1、代谢组学技术较好的反映了移植供肝代谢产物随保存时间的代谢变化情况,为移植供肝质量和功能的评估和判断提供了一种重要的分析手段。2、利用模式识别方法找到了可用于移植供肝质量和功能评估早期诊断的潜在代谢标志物,其中乳酸、琥珀酸盐、次黄嘌呤、别嘌呤醇、腺苷等,可以作为诊断移植供肝质量和功能的潜在代谢标志物,基于这些标志物信息构建的预测模型可实现移植供肝质量和功能的早期预测。