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环链棒束孢Isaria cateniannulata在自然界广泛存在,对螨类及鳞翅目等害虫具有较好的控制效果,生物防治上具有广阔的应用前景。本文以危害烤烟生产的重要经济害虫斜纹夜蛾Spodoptera litura为靶标,通过8株棒束孢菌株的鉴定和室内生物测定,获得一株对斜纹夜蛾前蛹和2龄幼虫的高毒力环链棒束孢菌株GZUIFR04XS8,并进一步评价了该菌在室内和田间条件下对斜纹夜蛾幼虫的致病力;初步研究了环链棒束孢菌株GZUIFR04XS8在土壤中致死斜纹夜蛾蛹的条件,并以含Cu2+的选择性培养基为检测手段,检测了环链棒束孢菌株GZUIFR04XS8在不同土壤环境中种群数量的动态变化。以期为环链棒束孢防治烟草斜纹夜蛾提供思路及实践依据。本文主要得到以下结论:(1)环链棒束孢菌株GZUIFR04XS8优效菌株评价通过对8株棒束孢菌株进行形态学和分子系统学鉴定,用拌土法和浸渍法测试了各菌株对前蛹和2龄幼虫的致死率,检测高毒力菌株对2龄幼虫的最佳感染温度及对2～5龄幼虫的致病力,并在田间对低龄幼虫进行防效评价。结果显示:菌株GZUIFR08XS1、GZUIFR04XS8、GZUIFR08XS13为环链棒束孢I.cateinannulata,菌株GZUIFR08LYS4、GZUIFR04XS5、GZUIFR04XS7、GZUIFR08XS12、GZUIFR04XS16为粉棒束孢I.farinos;8株菌对斜纹夜蛾蛹和2龄幼虫均有致死效果,拌土法接种浓度2×108孢子/mL,GZUIFR08XS1、GZUIFR04XS8对前蛹的致死率均为100%。接种浓度为1×10~8孢子/m L,GZUIFR04XS8对2龄幼虫致死率为78.21%,较其他菌株差异显著(P<0.05)为优效菌株。接种相同浓度的GZUIFR04XS8对不同虫龄幼虫校正死亡率随虫龄的增加而降低,控制2龄幼虫效果最好;GZUIFR04XS8对斜纹夜蛾幼虫的致死率随着孢子浓度的增加而增大,在1×109孢子/mL接种浓度下,校正死亡率接近100%;2～5龄幼虫的致死中浓度LC50分别为9.64×105孢子/m L、3.61×10~6孢子/mL、1.20×10~7孢子/mL、6.47×10~8孢子/m L,菌株GZUIFR04XS8对斜纹夜蛾2龄幼虫的最佳感染温度为23℃。在田间环境下GZUIFR04XS8(近饱和湿度、温度21.3～25.4℃)施菌量为5×1014孢子/hm2,环链棒束孢菌株GZUIFR04XS8对自然发生的斜纹夜蛾防效为69.74%,而对人工接放低龄幼虫的实验区具有80.40%的防效。(2)土壤中环链棒束孢菌株GZUIFR04XS8对斜纹夜蛾前蛹的防效评价拌土法、喷土表法、浸蛹法对前蛹的致死率。结果表明:拌土法接种2×107 spore/g,斜纹夜蛾羽化率最低、僵蛹率最高,分别为23.33%、70.00%;不同土壤环境条件和不同拌菌浓度下环链棒束孢菌株GZUIFR04XS8致死前蛹的测试中发现温度20℃时,对蛹的感染率最高,为88.33%;同一温度下,40%含水率的土壤环境下僵蛹率最高,为90%。104～108spore/g的土壤拌菌浓度范围,环链棒束孢菌株GZUIFR04XS8致死斜纹夜蛾蛹随土壤拌菌量的增加而增大,致死中浓度LC50为8.89×105 spore/g。温度为20℃、土壤含水率为40%时,在1×108 spore/g的土壤拌菌量下菌株GZUIFR04XS8对斜纹夜蛾前蛹的致死率为100%。(3)Cu2+选择性培养基发现及环链棒束孢菌株GZUIFR04XS8在土壤中的宿存动态发现1.0 g/L硫酸铜选择性培养基能较好地分离土壤中的环链棒束孢菌株GZUIFR04XS8,配方为葡萄糖40 g,蛋白胨10 g,硫酸链霉素0.1 g,青霉素钾0.1 g,硫酸铜1.0 g,水1000 mL。此培养基能够对细菌和4种常见污染真菌青霉、杂色曲霉、根霉、毛霉等具有较好的抑制效果,检出率为60.48～86.29%。环链棒束孢菌株GZUIFR04XS8在土壤中种群数量的变化受温度、含水率、土壤微生物、土壤质地和田间接菌量的影响较大,各条件下菌株GZUIFR04XS8在土壤中的种群数量基本呈现前期快速下降、后期下降变缓的趋势。高温环境不利于环链棒束孢宿存,而-5℃低温最有利于环链棒束孢的宿存,180天维持了最高菌群数量546830 cfu/g,是同时期4℃、15℃、25℃宿存量的2.80倍、4.59倍、14.32倍;土壤含水率15%时环链棒束孢的种群数量可维持在较高水平,180天宿存量为451434cfu/g,分别是同时期土壤含水率为10%、20%、25%、30%宿存量的4.97倍、2.65倍、12.40倍、16.15倍;沙壤土是环链棒束孢宿存的最佳土壤,180天时环链棒束孢在其中宿存量为129366 cfu/g,是同时期沙土菌群数量的1.79倍、黏土菌群数量的2.99倍;土壤微生物对环链棒束孢菌群数量前期表现一定的抑制作用,而后期则有一定的促进效果,各个宿存时期灭菌土壤的菌群数量均大于未灭菌土中的菌群数量,宿存180天,灭菌土的带菌量为391029cfu/g是未灭菌土的1.16倍;此外,野外环境下,环链棒束孢的菌群数量下降速度加快,初始施菌量越大,菌群数量损失越多,90天时,初始接菌量为1 g/kg时检测不到菌群数量,而初始接菌5 g/kg时在田间的宿存量最高,180天时环链棒束孢菌群数量为218775 cfu/g,分别是初始接菌10 g/kg、15 g/kg的1.23倍和1.76倍。