【摘 要】
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毕氏肠微孢子虫（E.bieneusi）、兔脑炎微孢子虫（E.cuniculi）、海伦脑炎微孢子虫（E.hellem）和肠脑炎微孢子虫（E.intestianlis）是最常见的人兽共患微孢子虫,也是造成人类微孢子虫病（Microsporidiosis）最主要的四种病原。近年来也在国内外动物园动物中不断检出,其致病性和人畜共患风险值得关注。国内登记在册圈养小熊猫数量490只,其中四川拥有最大的圈养小熊
【基金项目】
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成都大熊猫繁育研究基金会项目“大熊猫及其伴生动物微孢子虫流行病学调查及分子特征初步研究”（CPF2017-12）；
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毕氏肠微孢子虫（E.bieneusi）、兔脑炎微孢子虫（E.cuniculi）、海伦脑炎微孢子虫（E.hellem）和肠脑炎微孢子虫（E.intestianlis）是最常见的人兽共患微孢子虫,也是造成人类微孢子虫病（Microsporidiosis）最主要的四种病原。近年来也在国内外动物园动物中不断检出,其致病性和人畜共患风险值得关注。国内登记在册圈养小熊猫数量490只,其中四川拥有最大的圈养小熊猫种群（中国动物园2017年谱系资料）,但微孢子虫感染流行情况却知之甚少。有必要在该区域展开研究,掌握区域内E.bieneusi和上述三种脑炎微孢子虫的感染流行状况,为圈养小熊猫的寄生虫病防控提供参考。本研究采集了四川6个动物园中不同圈养小熊猫个体的新鲜粪便198份。通过提取粪便总DNA,利用聚合酶链式反应（PCR）扩增特异性基因位点筛选阳性样本,双向测序获得基因序列。最终得到寄生虫的感染率、动物园和饲养模式感染差异以及基因型/亚型分布情况,并通过系统发育分析评估人畜共患感染的风险。结果显示,四川省内圈养小熊猫E.bieneusi总体感染率为12.1%（24/198）。不同动物园感染率从0%到18.0%不等,半散养模式感染率明显高于普通圈养模式（χ2=5.442,df=1,P＜0.05）。检出D,SC02,SCR1和PL2共四种ITS基因型,其中PL2为优势基因型,SCR1为新基因型。系统发育显示基因型D、SC02和SCR1具有人兽共患风险;而PL2人兽共患风险未知。ITS阳性分离株,经多位点分型（MLST）后发现3个多位点基因型（MLGs）。三种脑炎微孢子虫综合感染率达到4.0%（8/198）,E.hellem（n=2）,E.intestinalis（n=4）,和E.cuniculi（n=2）均有不同程度检出。各动物园间感染率为0-15.4%不等,不同动物园、不同饲养模式间感染率亦无显著差异。综上所述,四川圈养小熊猫种群中存在人兽共患微孢子虫感染流行,半散养饲养模式可能是影响E.bieneusi感染率的风险因素之一。圈养小熊猫作为人类微孢子虫病的潜在来源之一,需要持续监测其流行情况以及人兽共患的风险。
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