乙基多杀菌素与球孢白僵菌对烟粉虱的协同作用研究

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烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)繁殖能力强、寄主广泛,且能传播大量的植物病毒,对农作物造成严重的危害,是极为重要的世界性农业害虫。目前对烟粉虱的防治主要依靠化学杀虫剂,但生产实践中化学杀虫剂的过量、不合理使用,已导致烟粉虱对多种药剂产生抗药性。利用天敌昆虫与资源微生物进行生物防治,不仅可以有效避免害虫产生抗药性,还可以大大减少化学杀虫剂的使用量,是农业绿色健康持续发展的重要途径与内容。利用昆虫病原真菌防治烟粉虱是重要的生物防治措施之一,然而,昆虫病原真菌在防治害虫中存在侵染过程慢、防控效果不稳定等问题。因此,寻找和化学杀虫剂相容性较高的生物防治物,是兼顾靶标害虫速效性与持效性防控的关键。本论文选择包含新烟碱类、植物源类、微生物源类等不同类型的化学杀虫剂,筛选与球孢白僵菌相容性较好的药剂,并将球孢白僵菌与低剂量的化学杀虫剂结合,进一步评价化学杀虫剂与球孢白僵菌对烟粉虱的协同控制作用明确两者的联合应用潜力,为烟粉虱的持续绿色防控提供参考依据。主要研究结果如下:1.不同类型化学杀虫剂对球孢白僵菌生物学特性的影响从新烟碱类、植物源类、微生物源类等几种类型的化学杀虫剂中选择具有代表的10种,通过测定其对球孢白僵菌菌丝生长、孢子萌发和产孢量的抑制情况,筛选出与球孢白僵菌Bb252相容性较好的化学杀虫剂。研究结果表明吡蚜酮在田间推荐浓度、田间推荐浓度稀释5倍和稀释10倍时对球孢白僵菌Bb252菌丝生长的抑制率分别为-0.87%、-2.72%、-0.78%,对孢子萌发的抑制率分别为43.31%、32.41%、5.24%,对产孢的抑制率分别为57.50%、49.75%、32.50%,表明吡蚜酮与球孢白僵菌Bb252相容性较好。此外,乙基多杀菌素与球孢白僵菌Bb252相容性仅次于吡蚜酮,三种浓度处理下对球孢白僵菌Bb252菌丝生长的抑制率分别为4.81%、7.12%、5.78%,对孢子萌发的抑制率分别为18.42%、16.21%、9.73%,对产孢量的抑制率分别为92.33%、63.92%、46.18%。2.吡蚜酮和乙基多杀菌素对球孢白僵菌生理生化及致病力的影响以初筛获得的吡蚜酮与乙基多杀菌素为对象,从生理生化层面测定其对球孢白僵菌几丁质酶和胞外蛋白酶活性的影响。结果表明吡蚜酮在田间推荐浓度、田间推荐浓度稀释5倍和10倍三种浓度处理下球孢白僵菌几丁质酶的活性分别为110.06、109.72、113.06 U/m L,除田间推荐浓度稀释10倍浓度外,其余两个浓度对球孢白僵菌几丁质酶的活性均产生显著影响;与几丁质酶不同,三个浓度处理下的胞外蛋白酶的活性分别为7.87、7.63、9.34μg/min.m L,三种处理浓度均会影响球孢白僵菌胞外蛋白酶的活性。乙基多杀菌素在三种浓度处理下对球孢白僵菌几丁质酶的活性分别为108.10、112.72、114.27 U/m L,仅田间推荐浓度会对几丁质酶活性产生影响;胞外蛋白酶的活性分别为21.63、22.06、21.20μg/min.m L,三种浓度不会影响胞外蛋白酶的活性。其次,测定两种药剂对球孢白僵菌致病力的影响,试验结果表明吡蚜酮和乙基多杀菌素处理球孢白僵菌后,球孢白僵菌对烟粉虱卵、一龄若虫、二龄若虫及三龄若虫的致死率与对照相比均不存在显著差异。最后,测定两种药剂作用下球孢白僵菌对烟粉虱取食和产卵选择的影响,试验结果表明吡蚜酮和乙基多杀菌素处理球孢白僵菌后均未影响球孢白僵菌对烟粉虱的趋避作用。3.乙基多杀菌素与球孢白僵菌联合应用对烟粉虱的毒力效应以筛选出对球孢白僵菌生理生化及致病力影响较小的乙基多杀菌素为对象,比较球孢白僵菌与低剂量的乙基多杀菌素在不同使用顺序下对烟粉虱的联合毒力效果,筛选出二者联合应用的最佳方式。试验结果表明使用乙基多杀菌素24 h、48 h、72 h后使用球孢白僵菌处理烟粉虱时,烟粉虱的存活曲线均处于预测区间内,未表现出明显的协同作用;在球孢白僵菌处理24 h、48 h、72 h后使用乙基多杀菌素处理烟粉虱时,仅在球孢白僵菌处理72 h后间隔使用乙基多杀菌素的处理方式下,烟粉虱的存活曲线低于预测区间,表现出两者的协同增效作用。此外,测定乙基多杀菌素与球孢白僵菌在9:1、4:1、1:1、1:4、1:9不同配比下烟粉虱的死亡情况,研究结果表明当二者混用的比例为9:1、4:1、1:4时共毒系数分别为159.08、153.12、258.45均大于120,具有一定的增效作用,其中混用比例为1:4时共毒系数最高,是乙基多杀菌素与球孢白僵菌混用的最佳配比。综上所述,本学位论文从不同类型化学杀虫剂筛选获得对球孢白僵菌生物学特性影响最小的乙基多杀菌素,综合使用顺序、使用时间间隔以及混配比例等因子,明确乙基多杀菌素与球孢白僵菌联合应用的最佳模式,研究结果为烟粉虱的绿色、持续防控提供理论依据与技术支撑。
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