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磁性高分子微球是一种由Fe<,3>O<,4>粒子和高分子材料复合形成的新型功能材料。磁性高分子微球的性能主要体现为磁响应性和表面功能基团的反应性。本文将天然高分子壳聚糖和Fe<,3>O<,4>粒子结合制备壳聚糖磁性微球,具有重要的学术意义和应用价值。壳聚糖磁性微球因将其表面改性可以赋予多种与活性物质反应的特殊功能基团,同时又因其具有顺磁性,在外加磁场作用下能快速分离,使原来昂贵、低效的分离技术变为低廉、高效。改性壳聚糖磁性微球作为新型的功能高分子材料在精细化工、环境监测、固定化酶、靶向药物、细胞分离等领域有着广泛的应用前景。
本文合成了两种磁性高分子微球,并分别应用于血液灌流和固定化酶方面,获得令人满意的结果,其主要的研究内容和结论如下:
(1)以(NH<,4>)<,2>Fe(SO<,4>)<,2>·6H<,2>O、NH<,4>Fe(SO<,4>)<,2>·12H<,2>O和壳聚糖为原料,经羟丙基化、胺基化,采用一步包埋法制备了一种多胺基化壳聚糖磁性微球。通过正交实验法确定了磁性微球的最佳制备条件,即搅拌速度1200r/min,壳聚糖用量3.0g,环氧氯丙烷用量2.5mL,乙二胺用量2.5mL。并用IR、TG、XRD和SEM对其结构及形貌进行了表征,结果表明:Fe<,3>O<,4>磁性粒子已包埋了一层多胺基化壳聚糖。磁性微球胺基含量为2.302mmol/g;基本呈球形,平均粒径为209nm,且具有顺磁性和良好的耐酸性。
(2)以具有良好生物相容性的多胺基化壳聚糖磁性微球为载体吸附胆红素,研究了其在不同pH、温度、离子强度、初始浓度、牛血清白蛋白等条件下,对胆红素的吸附性能的影响。结果表明,该磁性微球对胆红素具有良好的吸附性能。
(3)以(NH<,4>)<,2>Fe(SO<,4>)<,2>·6H<,2>O、NH<,4>Fe(SO<,4>)<,2>·12H<,2>O和壳聚糖为原料,经羟丙基化、Cu(Ⅱ)螯合,采用一步包埋法制备了Cu(Ⅱ)螯合壳聚糖磁性微球。通过正交实验法确定了磁性微球的最佳制备条件:搅拌速度1200r/min,壳聚糖用量3.0g,环氧氯丙烷用量1.0mL,CuCl<,2>·2H<,2>O 0.010mol,并用IR、TG、XRD和SEM对其结构及形貌进行表征,结果表明:Fe<,3>O<,4>磁性粒子已包埋了一层Cu(Ⅱ)螯合壳聚糖,基本呈球形,平均粒径为240nm,且具有顺磁性。
(4)针对当前固定化酶载体和固定化方法的不足,本文以Cu(Ⅱ)螯合壳聚糖磁性微球用作固定化胃蛋白酶的载体,讨论了固定化时间、pH值和给酶量对固定化的影响。最适固定化条件为:固定化时间1h、pH4-5、给酶量150mg/g载体。与自由酶比较,固定化胃蛋白酶催化特性和稳定性均令人满意。
(5)将磁性固定化胃蛋白酶初步应用于牛奶的水解,结果表明其对牛奶水解有一定的催化作用,水解的最佳条件为:磁性固定化胃蛋白酶的添加量1.50g、水解pH4.0、水解温度60℃、水解时间2h。