膜联蛋白(Annexin)是一种—钙离子依赖的方式与负离子磷脂结合的蛋白家族,在从真菌到高级脊椎动物的超过65个物种中总共鉴定出160多种独特的膜联蛋白。其中膜联蛋白5(annexin 5,A5)是膜联蛋白家族成员中含量最丰富的蛋白,约占细胞总蛋白的1%,其分子量约36kD。已有研究表明annexin 5具有多种功能,如抗凝血、具有钙离子通道活性、抑制磷脂酶A2和蛋白激酶C的活性,可能参与胞吞和胞吐作用等。Kawaminami等研究发现annexin 5存在于大鼠的甲状腺、肾上腺、卵巢、睾丸等内分泌器官,并呈细胞特异性分布。应激(stress)是机体对内外环境剧变刺激作出的包括精神、神经、内分泌和免疫等方面的综合应答状态。由神经损伤引起的病理性神经疼痛是一种持续疼痛,激活下丘脑—垂体—肾上腺皮质(HPA)轴和中枢自律系统。大量研究表明,慢性躯体和心理应激均能抑制或损伤雄性动物的性腺轴功能,延迟男性青春期发育,影响精子生成,甚至造成永久不育。强烈的身心应激尤其是长期慢性应激严重影响着人类的身心健康,导致临床疾病、亚健康状态及早衰。目前认为慢性疲劳综合征和抑郁症的发生均与长期应激有关。应激危害生殖内分泌功能的事实,早已得到国外学者的广泛认同。本实验室先前的研究发现,慢性疼痛应激大鼠睾丸组织中annexin 5 mRNA及蛋白水平表达均显著降低,生殖相关参数下降,同时睾酮分泌也受到抑制；体外实验证实,于大鼠睾丸间质细胞(leydig cell)培养液中加入annexin 5(?)(?)增加间质细胞睾酮的分泌,并且这种刺激作用具有剂量与时间依赖性。进一步的实验证实,ERK1/2 MAPK是annexin 5调控睾酮合成的关键信号通路。提示annexin 5可能是一种重要的生殖内分泌调控因子。为了进一步研究annexin 5在生殖系统中的作用,我们建立了慢性疼痛应激模型—坐骨神经分支选择性损伤(spared nerve injury, SNI)模型,探讨annexin 5在由慢性疼痛应激造成的生殖损伤中的保护作用及其机制。本实验共分四大部分：第一部分,用三种不同剂量的annexin 5 (7.5μg/kg、15μg/kg、30μg/kg)腹腔注射正常SD大鼠以确定最适注射剂量。腹腔注射21d后,与对照组(腹腔注射等量的pH8.0 Tris-HCl)相比,15μ/kg实验组大鼠附睾系数与精子相对计数均显著提高(P<0.05)；其它剂量组与对照组相比均无显著性差异(P>0.05)。7.5μg/kg组和15μg/kg组大鼠血清睾酮含量显著高于对照组(P<0.01),30μg/kg组大鼠睾酮含量虽也有升高,但与对照组比较,结果无统计学意义(P>0.05)。第二部分：建立SNI模型。实验分为3组：正常对照组、假手术组、模型组。模型组结扎并切断胫神经和腓总神经以建立SNI模型；假手术组只暴露坐骨神经干及其分量来实现的。