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目的:观察非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中IRE-1α-CHOP、Caspase12通路相关基因的表达变化,探讨IRE-1α-CHOP、Caspase12信号通路在NAFLD发病机制中的作用,观察二甲双胍对肝细胞凋亡中IRE-1α-CHOP、Caspase12通路干预作用,探讨二甲双胍影响NAFLD的可能机制。方法:将C57BL/6J雄性8周小鼠30只分为三组:正常对照组(A)、模型对照组(B)和二甲双胍组(C),每组10只。正常对照组小鼠常规饲料喂养;模型对照组及二甲双胍组均给予高脂饮食喂养,8周后选取2只观察脂肪肝模型建立成功后,二甲双胍组开始给予二甲双胍药物(150mg/(kg.d))灌胃干预4周,正常对照组及模型对照组均予等体积生理盐水灌胃处理。末次用药后禁食12小时,麻醉状态下,称取小鼠体重、肝重、双侧附睾周围脂肪组织,并计算肝指数、脂肪指数;心脏采血检测血清ALT、TG;收集肝组织,一部分用于组织病理切片,另一部分液氮速冻后转-80℃保存待测肝组织中GRP78、IRE1ɑ、CHOP、Caspase12、Bcl-2、Bim等基因m RNA与蛋白表达水平;TUNEL法测肝细胞凋亡指数。结果:1.三组小鼠体重、肝脏重量、脂肪重量、肝脏指数、脂肪指数比较:与正常对照组相比,经过高脂饮食喂养后12周,模型对照组小鼠体重明显升高(32.3675±2.2568vs29.6975±2.1513,p=0.022),肝脏重量升高不明显(1.5488±0.1537vs1.4188±0.1193,p=0.073)),肝脏指数亦无显著差异(0.0464±0.0027vs0.0478±0.0025,p=0.302),脂肪重量明显升高(1.0038±0.4294vs0.5163±0.1761,p=0.002),脂肪指数亦显著升高(0.0305±0.0106vs0.0174±0.0058,p=0.002)。与模型对照组相比,二甲双胍组小鼠在高脂喂养8周后开始于二甲双胍药物干预4周后,二甲双胍组小鼠体重明显下降,差异有显著性(28.9913±2.0693vs32.3675±2.2568,p=0.005),肝脏重量稍下降(1.5038±0.1378vs1.5488±0.1537,p=0.52),肝脏指数反有升高表现(0.0533±0.0024vs0.0464±0.0027,p=0.000),且差异有统计学意义,脂肪重量明显下降(0.4138±0.0986vs1.0038±0.4294,p=0.000),脂肪指数明显下降,差异有统计学意义(0.0145±0.0042vs0.0305±0.0106,p=0.000)。2.三组小鼠血浆中转氨酶及脂质水平比较:与正常对照组相比,经过高脂饮食喂养后12周,模型对照组小鼠ALT明显升高(61.35±16.43vs27.6±7.62,p=0.000);TG明显升高(105.67±17.44vs65.84±18.77,p=0.000);与模型对照组相比,二甲双胍组小鼠在高脂喂养8周后开始于二甲双胍药物干预4周后,二甲双胍组小鼠ALT明显下降(43.55±13.77vs61.35±16.43,p=0.013),二甲双胍组小鼠TG明显下降(88.69±6.42vs105.67±17.44,p=0.037)。3.三组小鼠肝组织病理学及组织学评分结果比较:肝组织行病理切片、HE染色后,与正常对照组,高脂喂养后模型对照组小鼠肝组织可见明显肝脂肪变性(p<0.01),与模型对照组相比,二甲双胍组小鼠肝脏脂肪变程度有减轻,差异有显著性意义(p
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