朝医方清肺泻肝汤对2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝大鼠AMPK信号通路的影响

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目的:探讨朝医方清肺泻肝汤(QFXGT)对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠AMPK信号通路的影响及其作用机制。方法:将50只雄性SD大鼠,随机分成正常组(N=10)和待造模组(N=40)。采用高脂高糖饲料喂养,结合腹腔内注射低剂量链脲佐菌素(STZ)方法,建立40只T2DM合并NAFLD大鼠模型,随机分为模型组、阳性药物组即二甲双胍组(剂量为100 mg·kg-1·d-1)、清肺泻肝汤高剂量组和低剂量组(剂量分别为400、200mg·kg-1·d-1)各10只。连续灌胃28天,记录每7天的体重和空腹血糖(FBG),末次给药后处死大鼠,取腹主动脉血、肝组织。称取体重与肝重并计算肝重指数(LI),采用ELISA法测定血清中空腹胰岛素含量(FINS)并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C);采用HE染色法观察肝组织病理变化;采用Western Blot方法检测p-AMPK、AMPK、p-acc和ACC的蛋白表达量。结果:同正常组比较,模型组体重与LI、HOMA-IR均显著上升(P<0.01),ALT、AST、TC、TG和LDL-C含量均上升,HDL-C下降(P<0.05);HE染色结果显示,模型组大鼠有显著的肝脏脂肪变性;Western Blot结果显示,肝细胞中p-AMPK、AMPK和p-ACC的蛋白表达降低,ACC蛋白表达升高(P<0.05)。同模型组比较,二甲双胍组和清肺泻肝汤高剂量组、低剂量组大鼠的体重、LI和HOMA-IR均显著下降(P<0.01),ALT、AST、TC、TG和LDL-C含量均下降,HDL-C上升(P<0.05)。HE染色结果显示,经QFXGT治疗后的大鼠肝组织的脂肪变性程度减轻,炎性细胞浸润及坏死灶减少;Western blot结果显示,经QFXGT治疗后的大鼠肝细胞中p-AMPK、AMPK和p-ACC的蛋白表达上升,ACC蛋白表达降低(P<0.05)。结论:朝医方清肺泻肝汤可以有效提高T2DM合并NAFLD大鼠的胰岛素敏感性,减轻胰岛素抵抗,通过激活AMPK信号通路,减少肝脂质沉积,改善脂代谢紊乱,缓解肝损伤达到保护肝功能。
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