鸭传染性浆膜炎是由鸭疫里氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA）引起的急性传染性疾病,其特征是心包和肝腔中的纤维蛋白渗出物、脑膜炎、气囊炎、干酪性输卵管炎和败血症。已鉴定出至少21种血清型,但血清型之间没有显著的交叉保护作用,针对鸭疫里氏杆菌研发的疫苗对不同血清型只有较低的交叉保护效果。鸭疫里氏杆菌作为世界范围内重要的家禽病原体,给全世界养鸭业造成重大经济损失,但确切的致病机制尚不清楚。因此,利用分子生物学的方法研究鸭疫里氏杆菌的致病机理和免疫机制具有重要意义。本研究通过超高速离心的方法分离得到鸭疫里氏杆菌SX-1株外膜囊泡（outer membrane vesicles,OMVs）,进行透射电镜观察、粒径和蛋白质组学分析,筛选并获得鸭疫里氏杆菌SX-1株外膜囊泡携带的效应蛋白。以鸭疫里氏杆菌SX-1株为亲本株,通过构建重组自杀性质粒,采用接合转移同源重组的方法缺失SX-1株外膜囊泡HBP基因,为探索鸭疫里氏杆菌的感染致病机制和构建鸭疫里氏杆菌基因工程疫苗奠定基础。主要研究结果如下:（1）将鸭疫里氏杆菌SX-1株培养上清通过100 k Da超滤管浓缩过滤再经过100,000×g超高速离心2 h,用1 m L PBS重悬获得外膜囊泡;利用透视电镜观察发现囊泡呈圆形、椭圆形或不规则形的具有双层膜的囊泡状结构物质;利用Zeta View纳米颗粒追踪分析仪确定RA OMVs粒径大小在100～200 nm之间。（2）对鸭疫里氏杆菌SX-1株外膜囊泡进行蛋白质组学分析,共鉴定出148个蛋白,根据来源分析有24个蛋白来源于胞质蛋白,有4个蛋白来源于胞外分泌蛋白,有27个蛋白来源于外膜蛋白,有10个蛋白来源于周质蛋白,还有83个未知来源的蛋白。其中有多个蛋白与血红素（heme）结合相关,而heme是宿主体内最丰富的铁源,是病原菌与宿主竞争的主要目标,我们推测外膜囊泡heme相关基因可能与RA的致病性有关。（3）以鸭疫里氏杆菌SX-1株为亲本株,通过接合转移同源重组方法构建外膜囊泡heme-binding proteins（HBP）相关基因缺失株,成功构建HBP基因相关的4基因缺失株ΔHBP。生物学特性显示,与亲本株SX-1 OMVs相比,鸭疫里氏杆菌基因缺失突变株ΔHBP结合heme能力减弱,CAS检测板上形成的橘黄色光晕不明显,体外生长曲线表明ΔHBP基因缺失突变株生长速度减缓。挑选2个heme结合蛋白基因,分别构建p ET-30a RA0C＿0579/0582原核表达载体,诱导纯化获得RA0C＿0579、RA0C＿0582蛋白,通过与heme的结合试验证明这两个蛋白具有结合heme的能力。综上所述,本研究证明RA可以分泌外膜囊泡且含有多种蛋白质,鉴定了148种外膜囊泡蛋白,构建出ΔHBP 4基因缺失株,并证明HBP基因与RA血红素摄取有关,获得可以结合血红素的RA0C＿0579、RA0C＿0582蛋白。