秋水仙素诱导连翘多倍体的研究

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连翘(Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl)是木犀科常见的药用植物,它以果实和种子入药,具有清热解毒、消痈散结等功效。连翘是中医临床上最常用的中药之一,药用历史悠久,在临床有着广泛的应用。多倍体植株具有巨大性,诱导培育连翘多倍体植株可以增加连翘叶、果实和根部生长量,对连翘的药用及水土保持作用具有重要价值。本研究主要采用秋水仙素处理连翘籽苗生长点,研究了秋水仙素不同药液浓度,处理时间的诱变效果,通过茎尖细胞染色体数目检测和DNA相对含量测定的倍性鉴定方法,首次获得了连翘四倍体植株。并对四倍体连翘的叶片叶绿素含量,叶片含水量、光合特性和电导法测定细胞膜透性等指标与二倍体连翘叶片进行了比较,对进一步深入研究四倍体连翘做出基础性研究。主要研究结果如下:1.连翘幼苗茎尖诱导效果在秋水仙素处理连翘籽苗生长点中,研究了秋水仙素不同浓度与处理时间的最佳组合。从诱变效果看,0.1%~0.3%的秋水仙素对连翘幼苗生长点的诱导均有效,浓度为0.1%的秋水仙素在处理时间为48h时变异率最高为40%;浓度为0.2%的秋水仙素随着处理时间的增长,变异率上升,在72h处理时间变异率达到最高58.3%;当秋水仙素浓度为0.3%时,随着处理时间的延长,变异率下降,处理时间为24h变异率最高为56.7%,处理时间为72h变异率最低为23.3%。在9个处理组合中,以0.2%处理72 h的变异株率最高,达到58.3%,为最佳处理组合。2.变异植株形态结构变化诱导加倍后,形态、解剖学研究表明,变异体植株表现出多倍体特征,植株生长缓慢,叶片变厚,叶面积增大,叶形指数减小,保卫细胞增大,单位面积气孔数减少,叶绿体数明显增多;栅栏组织、海绵组织增宽,茎尖分生组织层细胞均增大。3.变异植株鉴定结果细胞学鉴定研究表明,对照株的染色体数为2n=2x=28,变异株的染色体数为2n=4x=56;采用流式细胞仪法测定细胞中DNA的相对含量结果显示,加倍植株细胞中DNA含量增加了一倍,由2n变成了4n,但是变异植株中也存在大量嵌合体,染色体倍数处于2n到4n之间,含少数八倍体细胞。4.四倍体连翘与二倍体连翘部分特征比较结果结果得出连翘四倍体叶绿素含量显著高于连翘二倍体;连翘四倍体叶片含水量高于二倍体叶片含水量,差异不显著;连翘四倍体光合作用强度高于二倍体光合作用强度;连翘四倍体电导率和电解质外渗率均显著低于二倍体电导率和电解质外渗率,抗性增强。说明连翘加倍后在植株形态与物质含量及生理特征方面都有了比较显著的变化。
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