香鱼adiponectin的分子鉴定及其对单核/巨噬细胞的免疫调节作用

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脂联素(adiponectin,ADP)是先天免疫的调节剂,在哺乳动物的炎症反应和新陈代谢过程中发挥重要的作用。然而,ADP在鱼类免疫系统中的调控作用还知之甚少。在本文中,我们首次克隆出香鱼(Plecoglossus altivelis)的ADP基因并获得其cDNA序列,命名为PaADP。多重序列比对结果显示出香鱼的ADP呈现出ADPs的典型特征。系统进化树分析的结果表明PaADP与虹鳟(Oncorhynchus mykiss)ADP的进化关系最为接近。PaADP在健康香鱼大多数组织和细胞中表达,其中在脂肪组织中表达量最高。香鱼经鳗弧菌(V.anguillarum)体内感染后,除脂肪组织外,其他组织和细胞中的PaADP mRNA表达水平均显著上调。香鱼全长ADP(fPaADP)以及其球状结构域(gPaADP)在细菌中原核表达并纯化,获得抗血清。蛋白质印迹分析表明香鱼血清中存在ADP的三个片段形式,其中包括fPaADP和gPaADP。重组蛋白fPaADP通过上调抑炎因子,下调促炎因子,抑制香鱼单核巨噬细胞(monocytes/macrophages,MO/MΦ)吞噬作用并促进其杀菌能力,从而表现出抑炎效果。相反的,重组蛋白gPaADP通过上调促炎因子,下调抑炎因子,促进MO/MΦ吞噬作用并抑制其杀菌能力,表现出促进炎症作用。这些结果都表明fPaADP和gPaADP在调控香鱼巨噬细胞的功能上具有相反作用。
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