【摘 要】
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QM基因是从人维尔姆斯肿瘤杂合细胞中首次分离到的,最初认为与人维尔姆斯肿瘤抑制相关。在随后的研究中,人们发现QM基因产物还具有c-jun等原癌基因转录调节、Src家族信号转导、
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QM基因是从人维尔姆斯肿瘤杂合细胞中首次分离到的,最初认为与人维尔姆斯肿瘤抑制相关。在随后的研究中,人们发现QM基因产物还具有c-jun等原癌基因转录调节、Src家族信号转导、核糖体构型与功能维持等多种生物学活性,它参与细胞生长、分化、发育和凋亡等重要生命活动过程。QM同源基因广泛地存在于动物、植物以及真菌界。结构分析结果表明,QM同源基因在进化上是比较保守的。在小鼠和人中,QM基因是以多拷贝形式存在的,并且它在多种组织中都有表达。虽然已有的研究表明QM是一种多功能基因,但有关其具体的生物学功能与作用机制尚不很清楚。迄今,鱼类中尚未见QM基因的研究报道。本文应用生物信息学和分子克隆等技术,首次从鱼类中克隆出QM基因,为QM的分子进化以及生物学功能的深入研究打下基础。 我们首先通过电子克隆获得了斑马鱼QM基因序列信息,然后构建了草鱼头肾和脾脏λZAPII cDNA文库,利用QM基因的保守区域和载体序列,设计了系列特异性引物,通过套式和锚定PCR,克隆了草鱼QM同源基因,命名为GcQM。该cDNA基因全长751bp,开放阅读框编码215个氨基酸,预测的蛋白质大小为24.5kDa。GcQM编码的多肽与人QM多肽相比,相似性和同一性分别高达96%和92%;与果蝇相比,也分别有86%和76%。 我们对GcQM在草鱼主要组织细胞如脑、心肌、头肾、脾脏、肝脏、肠和肌肉中的表达进行了研究,同时对草鱼经出血病病毒(GCHV)、嗜水气单胞菌感染后各组织中QM的诱生型表达情况作了探讨。结果表明,GcQM在草鱼脑、心肌、脾脏中都有表达,其中脑和心肌中表达量很高,在肌肉、肠、头肾、肝脏中则没有表达。然而,在草鱼出血病病毒诱导组的头肾和肝脏中,GcQM表达上调;在嗜水气单胞菌诱导组的头肾中也出现相似情况。这一结果提示QM的表达是可诱导的,它与鱼类免疫功能的关系值得作深入研究。
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