【摘 要】
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目的:痛风是一种由尿酸代谢异常引起的风湿免疫病,受诸多因素影响。中医学将痛风归属“痹证”范畴,我们基于审证求机的原则,认为湿热蕴结,瘀毒内阻是急性痛风性关节炎的基本病机,并自拟二黄茯虎汤用于本病的治疗。本研究拟通过对二黄茯虎汤治疗急性痛风性关节炎的临床疗效观察和病理机制探究,为二黄茯虎汤的后续临床使用提供依据,也为急性痛风性关节炎的中医药防治给予新思路。方法:1.收集湿热瘀毒证急性痛风患者68例,
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目的:痛风是一种由尿酸代谢异常引起的风湿免疫病,受诸多因素影响。中医学将痛风归属“痹证”范畴,我们基于审证求机的原则,认为湿热蕴结,瘀毒内阻是急性痛风性关节炎的基本病机,并自拟二黄茯虎汤用于本病的治疗。本研究拟通过对二黄茯虎汤治疗急性痛风性关节炎的临床疗效观察和病理机制探究,为二黄茯虎汤的后续临床使用提供依据,也为急性痛风性关节炎的中医药防治给予新思路。方法:1.收集湿热瘀毒证急性痛风患者68例,将患者分为试验组和对照组,分别运用二黄茯虎汤和秋水仙碱进行一周的治疗,通过观察患者治疗前后VAS评分、CRP、ESR、SUA、中医证候积分和不良反应来评估二黄茯虎汤的临床疗效。2.足部注射单钠尿酸盐（MSU）晶体构建小鼠急性痛风性关节炎模型,随即将小鼠分为模型组、二黄茯虎汤低、中、高剂量组和阳性对照组。观察小鼠足部肿胀度、机械痛、热痛等指标检验二黄茯虎汤的疗效;测定足部IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α等炎症因子水平和炎症细胞浸润情况探究药物抗炎作用。检测足部NLRP3炎症小体相关成分及产物的蛋白质和mRNA水平变化观察NLRP3炎症小体活性变化;利用L-012探针及抗氧化酶试剂盒测定小鼠足部ROS的生成和相关酶活性。3.通过给予小鼠RAW264.7细胞脂多糖（LPS）和MSU的联合刺激构建细胞模型,采用Western blot、RT-PCR和免疫荧光评估二黄茯虎汤含药血清刺激下细胞中NLRP3炎症小体相关蛋白及产物的表达情况;CO-IP测定含药血清作用下细胞内NLRP3与NEK7的蛋白结合水平;通过Green-4 AM探针、DCFH-DA探针和抗氧化酶试剂盒的使用监测细胞内钾离子、ROS和酶活性的变化。结果:1.临床研究表明:二黄茯虎汤能够有效的降低关节疼痛VAS评分,改善CRP和ESR水平,与西药对照组疗效相当;且在中医证候积分方面优于西药对照组。2.实验研究表明:二黄茯虎汤有效缓解MSU诱发的小鼠机械痛和热痛,并且在缓解足部肿胀度上优于阳性对照组。中药药物干预后,模型鼠足部IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α等致炎因子的表达水平出现降低,MSU介导的炎症细胞浸润情况也有所缓解。与此同时,二黄茯虎汤能有效降低细胞和组织中caspase-1和IL-1β的mRNA和蛋白质的表达水平,抑制ASC寡聚体的形成,并降低MSU诱发的caspase-1活性。此外,二黄茯虎汤含药血清能够抑制细胞内NEK7与NLRP3的蛋白结合和ROS的产生,增加组织与细胞中GSH-Px与SOD的活性,同时降低MDA的生成。结论:1.二黄茯虎汤能有效改善急性痛风性关节炎的关节和全身症状,具有良好的抗炎镇痛效果。2.二黄茯虎汤可通过抑制ROS介导的NLRP3炎症小体的激活来发挥其治疗作用。
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