喉癌中Mir-145的表达下调与其启动子甲基化的相关性研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xingzhe009
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目的:检测Microrna-145在喉鳞状细胞癌组织和细胞中的表达水平及其启动子甲基化程度,探讨Microrna-145在喉癌中表达下调的机制。  方法:应用Real-time PCR方法检测Microrna-145在喉鳞状细胞癌组织、癌旁组织、喉癌细胞株HEP-2以及人支气管上皮细胞株16HBE中的表达水平,应用亚硫酸氢钠测序(BSP)检测HEP-2、16HBE中Microrna-145启动子CPG甲基化位点,在细胞和组织水平上应用甲基化PCR(MSP)进一步检测甲基化情况,用去甲基化试剂5-aza-2-deoxycytidine(DAC)处理HEP-2细胞,Real-time PCR检测处理前后Microrna-145表达水平,MTT方法检测细胞增殖能力变化,流式细胞仪和透射电镜方法检测细胞凋亡能力变化。  结果:与癌旁组织相比,Microrna-145在喉癌组织中表达明显降低,并与临床分期和淋巴结转移相关。与16HBE细胞相比,Microrna-145在HEP-2组中表达也明显降低,BSP结果显示HEP-2组较16HBE组中的Microrna-145 CPG岛甲基化位点明显增多,MSP显示Microrna-145在HEP-2细胞和喉癌组织中呈高甲基化状态,DAC处理HEP-2前后,Microrna-145的表达上升,其增殖能力降低,凋亡率显著增加并出现典型的凋亡形态学改变。  结论:本研究发现在喉癌组织及其细胞株HEP-2细胞中Microrna-145表达显著下降并且其启动子呈明显甲基化的趋势,Microrna-145的表达与喉癌临床分期和淋巴结转移相关,由此证明Microrna-145在喉癌发生、发展过程中发挥重要作用,其表达下调的机制可能与其启动子的甲基化程度有关。
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