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目的更年期抑郁症是指更年期女性在雌激素波动的基础上,因应激事件而诱发自主神经系统紊乱的疾病,是更年期女性最常见的精神障碍之一[1]。随着我国人口老龄化的日益加重,更年期抑郁的发病率逐年增高,目前受到越来越多的关注。柴坤解郁汤是治疗更年期抑郁的经验方,临床观察有一定疗效,但其作用机制尚不清楚。更年期抑郁的发生与神经功能减退密切相关,而BDNF、VEGF及其通路相关分子表达下降是神经功能障碍发生的主要原因之一。故本研究围绕更年期抑郁大鼠海马BDNF、VEGF通路相关分子的变化,探索柴坤解郁汤治疗更年期抑郁的起效机制,以丰富该方治疗更年期抑郁的实验依据。方法通过摘除双侧卵巢（OVX）术后1周复合3周慢性不可预见性应激（CUMS）的方法,制备更年期抑郁大鼠模型。80只SD雌性大鼠（190±20g）随机分为假手术组、去势组、应激组、模型组、西药对照组、柴坤解郁汤低剂量组（Low-dose Chaikun Jieyu Compound,LCKJYC）、柴坤解郁汤中剂量组（Middle-dose Chaikun Jieyu Compound,MCKJYC）、柴坤解郁汤高剂量组（High-dose ChaikunJieyu Compound,HCKJYC）,每组10只。假手术组仅切除卵巢旁等体积脂肪组织;去势组仅行OVX术;应激组仅同步进行CUMS;模型组、西药对照组、柴坤解郁汤组（LCKJYC、MCKJYC、HCKJYC）予以OVX术联合3周CUMS。应激开始时,西药对照组予以盐酸氟西汀2.33mg/（kg·d）灌胃,柴坤解郁汤低、中、高剂量组分别予以柴坤解郁汤颗粒剂0.90g/（kg·d）、1.80g/（kg·d）、3.60g/（kg-d）灌胃,其余各组大鼠灌胃同体积生理盐水2.5ml/（kg·d）,均为每天一次。于第4周,各组通过蔗糖水偏好试验、旷场试验和强迫游泳评价大鼠抑郁水平,采用ELISA法检测海马组织BDNF、VEGF含量;实时定量PCR法检测海马TrkB、VEGFR的基因表达;WB法检测海马TrkB、VEGFR蛋白含量。结果1.行为学1.1蔗糖水偏好试验与假手术组相比:模型组、应激组大鼠蔗糖水偏好度下降（P＜0.01,P＜0.01）;去势组大鼠蔗糖水偏好度无统计学差异（P＞0.05）。与模型组相比:西药对照组大鼠蔗糖水偏好度明显增加（P＜0.01）;MCKJYC、HCKJYC大鼠蔗糖水偏好度明显增加（P＜0.01）;LCKJYC大鼠蔗糖水偏好度差异无统计学意义（P＞0.05）。与西药对照组相比:LCKJYC大鼠蔗糖水偏好度降低（P＜0.01）;MCKJYC、HCKJYC大鼠蔗糖水偏好度差异无统计学意义（P＞0.05）。MCKJYC与HCKJYC大鼠蔗糖水偏好度无统计学差异（P＞0.05）。1.2旷场试验与假手术组相比:模型组大鼠水平得分、垂直得分减少（P＜0.01,P＜0.01）与模型相比:西药对照组大鼠水平得分、垂直得分明显增高（P＜0.01,P＜0.05）;LCKJYC大鼠水平得分、垂直得分无统计学意义（P＞0.05）;MCKJYC大鼠水平得分及垂直得分明显升高（P＜0.01,P＜0.05）;HCKJYC大鼠水平得分及垂直得分明显升高（P＜0.01,P＜0.01）。与西药对照组相比:LCKJYC的大鼠水平得分减少（P＜0.05）,垂直得分较低（P＞0.05）;MCKJYC、HCKJYC水平得分及垂直得分较高（P＞0.05）。与LCKJYC相比:MCKJYC大鼠水平得分增高（P＜0.05）,垂直得分较高（P＞0.05）;HCKJYC大鼠水平得分、垂直得分增高（P＜0.01,P＜0.05）。MCKJYC与HCKJYC大鼠水平得分、垂直得分无统计学差异（P＞0.05）。1.3强迫游泳与假手术组相比:模型、应激组大鼠不动时间增加（P＜0.01,P＜0.01）;去势组大鼠不动时间差异无统计学意义（P＞0.05）。与模型组相比:西药对照组大鼠不动时间减少（P＜0.05）;HCKJYC的不动时间减少（P＜0.05）;LCKJYC及MCKJYC的不动时间无统计学差异（P＞0.05）。与西药对照组相比,LCKJYC、MCKJYC及HCKJYC大鼠不动时间无统计学差异（P＞0.05）。与LCKJYC相比,MCKJYC及HCKJYC大鼠不动时间无统计学差异（P＞0.05）。MCKJYC与HCKJYC大鼠不动时间无统计学差异（P＞0.05）。2分子实验结果更年期抑郁大鼠海马BDNF、VEGF浓度,TrkB、VEGFR基因表达水平及蛋白水平均下降;柴坤解郁汤对以上指标均有上调作用。2.1 BDNF/TrkB通路实验结果BDNF:与假手术组相比,模型组、应激组BDNF浓度明显降低（P＜0.01）;去势组大鼠BDNF浓度差异无统计学意义（P＞0.05）。与模型相比,西药对照组、MCKJYC及 HCKJYC 大鼠得 BDNF 浓度结果升高（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01）;而LCKJYC的BDNF浓度差异无统计学意义（P＞0.05）。与西药对照组相比,MCKJYC、HCKJYC大鼠BDNF浓度差异无统计学意义（P＞0.05）。与LCKJYC相比,MCKJYC及 HCKJYC 大鼠 BDNF 浓度升高（P＜0.01,P＜0.01）。MCKJYC 与 HCKJYC 大鼠的BDNF浓度无统计学差异（P＞0.05）。TrkB基因:与假手术组相比:模型组的TrkB基因表达量明显下降（P＜0.01）;应激组大鼠TrkB基因表达量明显下降（P＜0.01）;去势组大鼠TrkB基因表达量差异无统计学意义（P＞0.05）。与模型组相比:西药对照组的TrkB基因表达量升高（P＜0.05）;MCKJYC大鼠TrkB基因表达量升高（P＜0.05）;HCKJYC大鼠TrkB基因表达量升高（P＜0.05）;LCKJYC大鼠TrkB基因表达量差异无统计学意义（P＞0.05）。与西药对照组相比:LCKJYC的TrkB基因表达量降低（P＞0.05）;MCKJYC和HCKJYC的TrkB基因表达量差异均无统计学意义（P＞0.05）。与LCKJYC相比:MCKJYC大鼠TrkB基因表达量升高（P＜0.05）;HCKJYC大鼠TrkB基因表达量升高（P＜0.05）。MCKJYC大鼠TrkB基因表达量与HCKJYC相比无统计学差异（P＞0.05）。TrkB蛋白:与假手术组相比:模型组大鼠TrkB蛋白表达量明显下降（P＜0.01）;应激组大鼠TrkB蛋白表达量明显下降（P＜0.01）;去势组大鼠TrkB蛋白表达量差异无统计学意义（P＞0.05）。与模型组相比:西药对照组TrkB蛋白表达量升高（P＜0.01）;MCKJYC的TrkB蛋白表达量升高（P＜0.01）;HCKJYC大鼠TrkB蛋白表达量升高（P＜0.01）;LCKJYC大鼠TrkB蛋白表达量差异无统计学意义（P＞0.05）。与西药对照组相比:LCKJYC大鼠TrkB蛋白表达量降低（P＜0.01）;MCKJYC和HCKJYC的TrkB蛋白表达量差异均无统计学意义（P＞0.05）。与LCKJYC相比:MCKJYC大鼠TrkB蛋白表达量升高（P＜0.01）;HCKJYC大鼠TrkB蛋白表达量升高（P＜0.01）。MCKJYC大鼠TrkB蛋白表达量与HCKJYC比无统计学差异（P＞0.05）。2.2VEGF/VEGFR通路实验结果VEGF:与假手术组相比,模型组、应激组的VEGF浓度明显降低（P＜0.01）;去势组的VEGF浓度差异无统计学差异（P＞0.05）。与模型相比,西药对照组、MCKJYC及HCKJYC大鼠VEGF浓度明显升高（P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01）;LCKJYC大鼠的VEGF浓度差异无统计学意义（P＞0.05）。与西药对照组相比,MCKJYC及HCKJYC大鼠VEGF浓度无统计学差异（P＞0.05）;LCKJYC大鼠VEGF浓度降低（P＜0.05）。与LCKJYC相比,MCKJYC及HCKJYC大鼠VEGF浓度明显升高（P＜0.01,P＜0.01）;MCKJYC与HCKJYC大鼠VEGF浓度无统计学差异（P＞0.05）。VEGFR基因:与假手术组相比,模型组大鼠VEGFR基因表达量明显下降（P＜0.01）;应激组大鼠VEGFR基因表达量明显下降（P＜0.01）;去势组的VEGFR基因表达量差异无统计学意义（P＞0.05）。与模型组相比:西药对照组的VEGFR基因表达量均升高（P＜0.05）;MCKJYC大鼠VEGFR基因表达量升高（P＜0.01）;HCKJYC大鼠VEGFR基因表达量升高（P＜0.01）;LCKJYC大鼠VEGFR基因表达量较高（P＞0.05）。与西药对照组相比:LCKJYC大鼠VEGFR基因表达量降低（P＜0.05）;MCKJYC和HCKJYC大鼠VEGFR基因表达量差异均无统计学意义（P＞0.05）。与LCKJYC相比:MCKJYC的VEGFR基因表达量升高（P＜0.05）;HCKJYC大鼠VEGFR基因表达量升高（P＜0.05）。MCKJYC大鼠的VEGFR基因表达量与HCKJYC相比无统计学差异（P＞0.05）。VEGFR蛋白:与假手术组相比,模型组大鼠VEGFR蛋白表达量明显下降（P＜0.01）;应激组大鼠VEGFR蛋白表达量明显下降（P＜0.01）;去势组的VEGFR蛋白表达量差异无统计学意义（P＞0.05）。与模型组相比:西药对照组的VEGFR蛋白表达量升高（P＜0.05）;MCKJYC大鼠VEGFR蛋白表达量升高（P＜0.01）;HCKJYC大鼠VEGFR蛋白表达量升高（P＜0.01）;LCKJYC大鼠VEGFR蛋白表达量较高（P＞0.05）。与西药对照组相比:LCKJYC大鼠VEGFR蛋白表达量降低（P＜0.05）;MCKJYC和HCKJYC大鼠VEGFR蛋白表达量差异均无统计学意义（P＞0.05）。与LCKJYC相比:MCKJYC的VEGFR蛋白表达量升高（P＜0.05）;HCKJYC大鼠VEGFR蛋白表达量升高（P＜0.05）。MCKJYC大鼠VEGFR蛋白表达量与HCKJYC相比无统计学差异（P＞0.05）。结论:通过OVX术后1周联合3周CUMS可成功制备更年期抑郁大鼠模型;柴坤解郁汤可增加更年期抑郁大鼠的快感及自主活动度,并改善探索欲望和绝望行为;对BDNF、VEGF通路相关分子表达的调节可能是柴坤解郁汤改善更年期抑郁的疗效机制。