马铃薯A病毒生物学检测及种群遗传学研究

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马铃薯A病毒(Patatao virus A,PVA)是制约世界上马铃薯生产中的主要病毒之一,近年来,随着湖南、云南、福建等马铃薯产区PVA发病率的提高、多种病毒复合侵染带来的严重危害引发广泛关注。本研究以心叶烟、香料烟、苋色藜等18种植物为材料,应用实时荧光定量(qRT-PCR)技术筛选PVA的鉴定寄主和最适繁殖寄主,为PVA的生物学研究提供基础材料;比对国内外PVA的基因序列开展种群遗传学分析,探究PVA系统进化情况,为了解PVA分子进化机制研究提供了依据;同时,选择氨基酸序列差异较大的三个PVA分离物,接种马铃薯品种和指示植物黄花烟,探究不同PVA分离物的致病性差异,并用致病性较强的PVA分离物接种10个马铃薯主栽品种,探究马铃薯被PVA及其他病毒复合侵染的表型研究,为有针对性预防其进一步扩大蔓延、制定合理防控策略提供重要依据。本研究取得的主要结果如下:1.将6个PVA分离物全基因组进行克隆测序,与GenBank中已上传的61个PVA分离物建立贝叶斯系统进化树,结果表明67个PVA分离物以高后验概率优先相聚为三个簇,且PVA具有一定的地域相关性和寄主相关性。经PVA两两序列一致性分析,所有PVA分离物可以聚为三个不同的组,与系统发育树的分析结果完全一致。2.PVA共能侵染6种寄主,其中5种寄主系统侵染,分别是香料烟、德莫尼烟、黄花烟、黄苗榆烟、假酸浆;1种寄主局部侵染,为洋酸浆;PVA的最适繁殖寄主为黄花烟。3.3个PVA分离物接种马铃薯品种及指示植物,2017-171产生明显的叶缘皱缩症状,其在马铃薯体内的PVA含量累计最高,表明2017-171分离物致病力最强,其次为KB117 和 2017-176。4.PVA侵染马铃薯主栽品种后,克新13号、尤金、早大白、克新25号、丽薯6号接种成功,兴佳、陇薯7号、陇薯10号、丽薯7号、大西洋通过摩擦接种及嫁接验证,均未接种成功,说明这5个品种对PVA抗性较强。发病高峰期时,克新13号体内病毒含量最高,PVA对其危害最重。5.PVA与其他病毒复合侵染结果表明,PVA与PVY、PVA与PVX、PVA与PSTVd处理组会产生更严重的生物学症状,马铃薯植株及块茎发生明显变化,例如PVA+PVY侵染克新13号时,植株出现严重的花叶及茎坏死症状,马铃薯块茎严重减产并出现畸形症状,从而对马铃薯造成的影响最显著,其次是PVA与PVS及PVA与PVM。
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