鲫（Carassius auratus）是世界上重要的淡水鱼种之一,《2021年中国渔业统计年鉴》显示,2020年我国鲫鱼产量约275万吨,在当年所有鱼类产量中排第五,占全年淡水鱼类产量的8.5%。然而,2015到2020年,鲫鱼产量在逐年下降。嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）和鲤疱疹病毒Ⅱ型（Cyprinid herpesvirus 2,Cy HV-2）是导致产量下降的主要病原体。表没食子儿茶素没食子酸酯（Epigallocatechin gallate,EGCG）具有抗多种病原微生物和广谱抗感染的活性。这为探索EGCG作为抗菌和抗病毒药物用于异育银鲫养殖中的潜力及其可能的机制提供了理论基础。本课题初探EGCG对嗜水气单胞菌和鲤疱疹病毒Ⅱ型的抑制效果并通过转录组学研究EGCG对鲫鱼鳍条细胞系（GiCF细胞）基因表达的影响,为EGCG渔药的开发提供理论基础。研究结果如下:1.EGCG抑制嗜水气单胞菌机理研究通过微量稀释法,测得EGCG对4株嗜水气单胞菌菌株的最小抑菌浓度为256～512μg/m L,最小杀菌浓度为1024μg/m L。生长曲线表明,EGCG对嗜水气单胞菌的抗菌效果与EGCG浓度和处理时间正相关。扫描电镜显示,和对照组相比,暴露于EGCG（2×MIC）的A56株嗜水气单胞菌细胞壁破碎、起皱和凹陷。酶标仪结果显示,EGCG可以自氧化产生H2O2,产量与剂量和时间正相关,12 h达到峰值。流式细胞仪结果显示,128～512μg/m L的EGCG可以诱导嗜水气单胞菌A56胞内ROS显著升高（P＜0.05）。氧化应激在EGCG抗菌作用中发挥重要作用,因为添加抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）和过氧化氢酶（CAT）后,EGCG的抑菌效果受到抑制,而且嗜水气单胞菌A56胞内ROS显著减少（P＜0.01）。此外,在异育银鲫和A56建立的感染模型中,口灌EGCG能显著提高鱼体组织清除细菌的能力（P＜0.01）。和对照组相比,40mg/kg（bw）剂量的EGCG能显著降低感染嗜水气单胞菌鲫鱼组织内的细菌载量（P＜0.01）。2.EGCG抑制鲤疱疹病毒Ⅱ型研究以鲫鱼GiCF细胞为感染模型,研究EGCG对鲤疱疹病毒Ⅱ型的抑制效果。通过MUSE细胞分析仪测定EGCG对GiCF细胞的安全浓度,结果显示10μg/m L以下的EGCG对GiCF细胞无明显毒性。通过测定TCID50、计算病毒拷贝数和蛋白免疫印迹法,发现EGCG靶向病毒颗粒发挥了抗病毒作用,50μg/m L EGCG处理Cy HV-2病毒2 h灭活效果可达99.99%,70μg/m L的EGCG能完全灭活Cy HV-2。EGCG能起到消毒剂的作用直接灭活Cy HV-2。因此,选择二氧化氯溶液和复合亚氯酸钠粉作为消毒剂对照,研究含氯消毒剂对Cy HV-2的灭活效果。结果发现12.5μg/m L标准二氧化氯溶液和250μg/m L复合亚氯酸钠溶液处理30 min以上,能灭活99.9%的Cy HV-2。EGCG具有和二氧化氯一样的消毒功效,有望开发以EGCG为主要成分的新型环保消毒剂。3.EGCG对GiCF细胞的转录组学分析对10μg/mL EGCG处理24 h的细胞和未处理细胞进行转录组测序,研究EGCG对GiCF细胞基因表达的影响。转录组共鉴定出1951个显著差异基因,其中1090个上调基因,861个下调基因。这些差异基因共富集22条KEGG通路,其中有10条代谢相关通路如氨基酸代谢通路和药物代谢,7条遗传信息处理相关通路,1条消化系统相关通路,1条疟疾相关通路,1条细胞周期通路和2条信号转导通路。2条信号转导通路为Fox O信号通路和PI3K-Akt信号通路。此外,挑选并验证了9个差异基因,分别是:smad4、pcna、Fox O1、GADD45、cdk2、mad2、myt1、DHFR和IL-6。qRT-PCR结果与转录组表现出相同的表达趋势,其中3个上调基因:smad4、Fox O1和GADD45;6个下调基因:pcna、cdk2、mad2、myt1、DHFR和IL-6。EGCG可能通过激活Fox O信号通路增强免疫应答和抑制炎症。该结果为渔用EGCG药物的开发及其可能涉及的机制提供参考。