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镁(magnesium,Mg2+)是机体中一种具有重要功能的元素。研究表明,Mg2+在调节血管平滑肌细胞和内皮细胞功能方面具有至关重要作用。Mg2+通过对血管平滑肌细胞Ca2+通道和激动剂-收缩偶联的影响以及血管对收缩因子和舒张因子反应性的影响调节血管紧张度。目前,很多流行病学及临床和实验研究已经证实Mg2+在高血压的血管张力调节中具有重要作用,但是Mg2+对肺动脉血管张力的调节的作用还鲜少研究。本研究通过KCl、环匹阿尼酸(cyclopiazonic acid,CPA)和OAG(1-oleoyl-2-acetyl-sn-glycerol)以及内皮素-1(endothelin-1,ET-1)比较Mg2+对不同激动剂引起的肺动脉(PAs)收缩效应的影响,用乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)和NOS抑制剂Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(Nω-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)观察Mg2+对肺动脉内皮依赖性舒张作用的影响,为研究Mg2+调节肺动脉血管功能的机制及其在PH中的变化提供新的科研依据。目的:观察Mg2+对小鼠PAs激动剂引起收缩以及PAs内皮依赖性舒张效应的影响,为研究Mg2+调节肺动脉血管功能的机制及其在PAH中的变化提供新的科研依据。方法:采用微血管张力检测方法,在无Mg2+(0 m M Mg Cl2)、正常Mg2+(1.2 m M Mg Cl2)和高Mg2+(4.8 m M Mg Cl2)情况下,(1)用三种不同类型Ca2+通道激动剂KCl、CPA和OAG观察Mg2+对三种不同类型Ca2+内流介导的正常小鼠去内皮PAs收缩效应的影响;(2)观察Mg2+对ET-1引起的去内皮PAs收缩效应的影响;(3)观察Mg2+对ET-1引起的内皮完整PAs收缩效应的影响,并比较内皮存在和不存在条件下PAs收缩效应的差异。(4)在内皮完整PAs上,观察Mg2+对ACh浓度依赖性舒张的影响,以及在NOS抑制L-NAME存在时Mg2+对ACh浓度依赖性舒张的变化。结果:1.Mg2+对不同类型Ca2+内流介导的去内皮PAs收缩效应的影响(1)在无Mg2+时,KCl引起的PAs收缩反应明显低于正常Mg2+;而高Mg2+时没有影响KCl引起的PAs收缩反应。提示,通过开放电压依赖性钙通道(VDCC)所介导Ca2+内流诱发的PAs收缩需要Mg2+的存在,而高Mg2+则对VDCC介导的Ca2+内流没有进一步影响。(2)在无Ca2+Kreb’s液(0m M Ca Cl2)中,CPA引起的PAs收缩反应在无Mg2+时明显高于正常Mg2+;而高Mg2+时明显低于正常Mg2+。加入2m M Ca Cl2时,PAs收缩反应在无Mg2+时与正常Mg2+没有明显差异,而高Mg2+时明显低于正常Mg2+。提示,无Mg2+肌浆网Ca2+释放增强,高Mg2+抑制CPA引起的Ca2+释放和内流。高Mg2+可通过抑制SOCE的功能,从而使其介导血管收缩反应减弱。(3)OAG没有引起的PAs明显收缩反应,且在三组不同浓度Mg2+时没有明显差异。提示,Mg2+对正常PAs中ROCE的功能无显著影响。2.Mg2+对ET-1介导的正常小鼠去内皮PAs收缩效应的影响在无Mg2+时和高Mg2+时,ET-1引起的去内皮PAs收缩效应低于正常Mg2+,ET-1反应的EC50大于正常Mg2+,而最大反应值Emax低于正常Mg2+。提示,ET-1引起的PAs收缩需要Mg2+的存在;高Mg2+可而抑制PAs收缩。3.Mg2+对正常PAs内皮依赖性舒张效应的影响(1)内皮存在时,ET-1引起的PAs收缩效应在无Mg2+时和高Mg2+时低于正常Mg2+,ET-1反应的EC50大于正常Mg2+,而Emax低于正常Mg2+。无Mg2+时,ET-1反应的EC50和Emax在内皮存在时与内皮不存在时没有明显差异;在正常Mg2+和高Mg2+时,ET-1反应的EC50内皮存在时大于内皮不存在时,ET-1反应的Emax内皮存在时低于内皮不存在时。提示:Mg2+的存在是PAs内皮依赖性舒张所必须的,高Mg2+可显著增强PAs的内皮依赖性舒张。(2)内皮存在时,ACh浓度依赖性舒张作用在无Mg2+时明显小于正常Mg2+,而高Mg2+时ACh浓度依赖性舒张大于正常Mg2+。用NOS抑制剂L-NAME处理后,ACh诱导的内皮完整PAs舒张反应受到明显抑制,不同浓度Mg2+之间抑制的程度相似。说明:血管内皮细胞产生血管舒张因子(NO)需要Mg2+的存在,高Mg2+可促进血管内皮细胞产生NO,从而使血管舒张。结论:1.Mg2+可呈剂量依赖性抑制肌浆网Ca2+释放引起的PAs收缩。无Mg2+对SOCE介导的PAs收缩效应无明显影响,但高Mg2+可显著抑制SOCE介导的PAs收缩。2.无Mg2+和高Mg2+均可抑制ET-1引起的PAs收缩反应。无Mg2+可抑制VDCC介导Ca2+内流引起的PAs收缩,而高Mg2+则无此作用。3.Mg2+可呈剂量依赖性增强PAs内皮依赖性舒张作用,其机制可能是通过刺激内皮细胞产生NO,从而促进PAs内皮依赖性舒张作用。