【摘 要】
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白内障是主要的致盲性眼疾。据报道,大约有高于43%的盲人患者是由白内障引起,严重地影响人们生活质量。现在由于生活条件的提高,糖尿病白内障的发病率越来越高,受到人们的关
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白内障是主要的致盲性眼疾。据报道,大约有高于43%的盲人患者是由白内障引起,严重地影响人们生活质量。现在由于生活条件的提高,糖尿病白内障的发病率越来越高,受到人们的关注。而晶状体上皮细胞正常的增殖、迁移、分化是保证晶状体正常发育的基础。一些证据已经表明必需微量元素硒(Se)对眼起重要的保护作用,其中内质网硒蛋白Sep15在维持眼晶状体透明中起着关键作用,但是Sep15在其中的机理仍不清楚。因此研究Sep15对白内障的防治作用及机理有着非常重要的科学意义。整合素α6在晶状体组织形态、增殖、分化中发挥着重要作用。本文采用人眼晶状体上皮细胞(h LECs)SRΑ01/04细胞系为研究对象,采用MTT、Western-Blot、RT-PCR手段探讨Sep15基因沉默对高糖诱导的h LECs中整合素表达的影响,主要结果如下:(1)采用MTT法测定不同浓度的葡萄糖对细胞存活率的影响,结果表明当葡萄糖浓度为45mM时,对细胞的损伤程度最大,可明显诱发内质网应激。然而当葡萄糖浓度为25mM时,细胞的存活率最高,整合素α6的表达最高,表明葡萄糖浓度为25mM是h LECs细胞的最佳生长环境。在此基础上,用40ng/m L bFGF促进hLE细胞的分化,bFGF作用时间的长短对整合素mRNΑ和protein表达不同。RT-PCR和WB结果分别显示bFGF作用时间为6h,整合素α6 mRNΑ表达最高;bFGF作用时间为24h,整合素α6 protein表达最高。当用bFGF和Glucose共同作用细胞时,当葡萄糖的浓度为25mM时,细胞的存活率最高,整合素α6 mRNΑ和protein表达水平都为最高;当葡萄糖浓度为45mM时反而抑制整合素的表达。可见高浓度的葡萄糖严重损伤细胞,影响整合素α6的表达。(2)研究了Sep15基因沉默对高糖诱导的hLECs中整合素表达的影响,结果表明Sep15基因沉默更加剧了高糖对hLECs分化过程中对整合素的影响作用。说明Sep15对晶状体上皮细胞的分化具有相应的保护作用。
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