急性B淋巴细胞白血病免疫球蛋白重链可变区T细胞表位的研究

来源 :首都医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhanggh20060363
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目的:该研究分析儿童B-ALL重链可变区基因的分子特征,鉴定儿童B-ALL重链可变区上可被HLA-A*0201限制性CTL识别的表位.方法:PCR扩增108例儿童急性白血病IgHV基因的CDR3,筛选有V<,H>DJ<,H>重排的克隆,继而分别扩增它们7个IgHV家族的重排基因.IgHV基因的PCR产物直接测序并翻译成氨基酸序列.利用互联网的生物信息资源分析B-ALL的IgHV基因利用胚系V<,H>、D、J<,H>片段进行重排以及基因变异的情况.利用HLA-A*0201/QLVQSGAEV四聚体(tetramers)分别于1轮刺激后培养第10天、3轮刺激后培养第21天检测HLA-A*0201限制性QLVQSGAEV特异性CTL的频率,了解抗原九肽QLVQSGAEV诱导正常PBL中特异性CTL增殖的免疫原性.结论:儿童B-ALL有V<,H>DJ<,H>基因重排、胞浆内可检测到μ重链,细胞表面无sIgM,为祖B细胞或前B细胞起源;B-ALL细胞中利用D7-27和DJ<,H>连接区缺乏N核苷酸者明显高于正常淋巴细胞,其恶性转化往往发生于胚胎期.B-ALL的IgHV基因虽有读码框移位、随机突变等肿瘤基因的共性,但尚未遭受抗原选择而发生体细胞超突变;其对胚系基因片段的利用受个体或细胞发育阶段的调节,无肿瘤选择倾向.因此儿童B-ALL的IgHV基因仍为胚系基因.
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