基于流式细胞术的红发夫酵母筛选及其利用餐厨垃圾合成类胡萝卜素的研究

来源 :赖静娴 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hufeng274240003
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
以餐饮垃圾为主的餐厨垃圾(Food waste,FW)全球每年约13亿吨被浪费,其传统的焚烧、垃圾填埋和堆肥处理会造成环境的污染和资源的严重浪费。含有丰富营养物质的餐厨垃圾是微生物生长的优良培养基。因此,基于微生物的餐厨垃圾增值作为一种生产有价值产品的环境友好且技术经济可行的策略引起了相当大的关注。红发夫酵母合成的虾青素是一种橙红色的类胡萝卜素,因强抗氧化活性和着色性而广泛应用于医药、食品、水产养殖和化妆品等领域。然而其虾青素含量低,碳源(可溶性糖类等)和氮源(酵母粉类等)的原料价格波动大,17~22℃温度培养的发酵能耗高,造成发酵成本高,严重制约虾青素的大规模生产和应用。基于上述问题,本论文通过菌株诱变和流式细胞术分选高产色素产量的红发夫酵母,研究了红发夫酵母利用餐厨垃圾的可行性,探究了红发夫酵母直接利用餐厨垃圾的机理,并探究了其发酵产物的饲料应用潜能。首先,通过紫外诱变和流式细胞分选技术进行菌株的选育,获得了一株能在25℃稳定高产类胡萝卜素的菌株,该菌株在YPD培养基中获得色素产量(32.89 mg/L)和含量(6.68 mg/g)较原始菌株分别显著提高了31.59%和32.28%。基于筛选菌株,探究了餐厨垃圾作为红发夫酵母发酵底物的可行性,结果表明红发夫酵母能以未经水解处理的餐厨垃圾为底物直接进行发酵。比较了四种发酵策略对红发夫酵母生长和代谢的影响,在底物浓度为10%FW和22℃中,直接发酵(Direct fermentation,DF)获得129.50 mg/L类胡萝卜素产量和1.08 mg/L/h产率,比分步糖化发酵(Separate hydrolysis and fermentation,SHF)分别提高了61.25%和61.19%,且其产量及产率接近同步糖化发酵(Simultaneous saccharification fermentation,SSF)(155.53 mg/L,1.30 mg/L/h)和预水解1 h同步糖化发酵(1 h pre-hydrolysis SSF,PSSF)(157.34 mg/L,1.31 mg/L/h),说明餐厨垃圾的直接发酵策略是可行的。进一步探究了红发夫酵母直接发酵餐厨垃圾的机理。研究表明餐厨垃圾中的31.59%米饭淀粉在高温灭菌条件下被部分转化成糊精等小分子物质,红发夫酵母在其诱导下产生淀粉酶将小分子物质进一步水解产糖促进类胡萝卜素的积累,其水解产生的糖量较初始提高了90.28%,类胡萝卜素产量为8.87 mg/L。此外,餐厨垃圾中的金属元素(411.50mg/L K、1404.42 mg/L Na、447.68 mg/L Ca、2.55 mg/L Zn、1.17 mg/L Mn、3.71 mg/L Al、6.63 mg/L Fe、68.48 mg/L Mg和0.35 mg/L Cu)以及9.05%大豆油均能促进红发夫酵母的生长和类胡萝卜素的积累。金属元素和大豆油的添加使生物量(0.46 g/L,3.11 g/L)分别较对照组显著提高了36.17%和29.05%。这表明了餐厨垃圾中的三种营养组分利于酵母生长和色素积累。基于筛选菌株和直接发酵策略,优化了餐厨垃圾的底物浓度,最佳底物浓度为20%,其色素产率为1.49 mg/L/h,比较发现高浓度底物对酵母生长和色素的积累有一定的抑制。餐厨垃圾的批次补料发现干FW对酵母色素的合成有抑制作用,而湿FW的补料能促进色素的积累,最佳的补料策略为10%FW+5%湿FW(12 h)+5%湿FW(36 h),色素产量达到了192.62 mg/L,与间歇培养相比显著提高了21%。干燥发酵产物含有13.47%淀粉、8.46%脂质、36.56%蛋白质、25.59%中性洗涤纤维以及13.08%酸性洗涤纤维等营养物质,重金属含量全部符合饲料标准。红发夫酵母发酵使餐厨垃圾的蛋白氨基酸含量显著提高,必需氨基酸/总氨基酸(44.88%)和必需氨基酸/非必需氨基酸(115.62%)分析表明发酵产物是质量较好的蛋白质源,氨基酸评分和化学评分表明该发酵产物的第一限制氨基酸是赖氨酸,而其他必需氨基酸成分(除了赖氨酸)的必需氨基酸指数评价(0.98)表明补充赖氨酸的发酵产物符合优质蛋白源的标准,但其微量元素含量较常见饲料低。最终1 kg的餐厨垃圾经红发夫酵母发酵后可获得373g发酵产物、784 mg类胡萝卜素以及111 mg虾青素。
其他文献
第五代移动通信快速增长的应用需求带来毫米波相控阵天线的研究热潮。目前在面向5G毫米波移动通信的相控阵天线研究中,单元天线半功率波束宽度较小、阵元间距大、阵元数量少等因素制约了毫米波相控阵天线的扫描角度范围。因此,本文基于阵列结构设计的概念,基于基片集成波导H面喇叭天线和双极化叠层贴片天线开展毫米波一维扫描相控阵天线的研究;针对所提出的非平面布局相控阵天线,提出一种基于混合整数优化的相控阵综合算法。
学位
二氧化碳置换法开采天然气水合物可以同时实现能源开发和碳封存,是天然气水合物开采技术中最具有应用潜力的方法。但二氧化碳置换法的开采率和能效较低,应用经济性较差,距工业化应用仍有差距。针对以上问题,本文将二氧化碳置换法与热激法联合,提出逐级式注热和Ca O自生热原位强化置换开采技术,以提高开采率和能效。并使用HYSYS软件模拟设计两种开采方案工艺,并计算和比较了两种开采方案的开采能效。为提高CH4开采
学位
竹红菌色素(Hypocrellins,HYPs)是从药用真菌竹红[Hypocrella bambusae(Berk.&Broome)Sacc.]或者竹黄(Shiraia bambusicola Henn.)的子座中分离得到的一类疏水性苝醌类化合物。其主要包括四种衍生物:竹红菌甲素(Hypocrellin A,HA),竹红菌乙素(Hypocrellin B,HB),竹红菌丙素(Hypocrellin
学位
[研究背景和目的]呼吸机相关肺损伤(Ventilator-induced lung injury,VILI)是由于呼吸机正压通气引起的肺部严重并发症。其病理生理机制包括气压伤和容积伤、萎陷伤及生物伤;近年来研究认为生物伤是VILI产生的主要原因。细胞自噬是一种通过溶酶体降解细胞内物质的分子机制,其作用是通过破坏溶解细胞内的蛋白质、细胞器并且再利用来维持细胞内合成过程的自稳态平衡;是面对外在伤害性刺
学位
社区志愿服务是开展校外教育、提升青少年公民道德水平的重要渠道。我国《青少年社会工作服务指南》以及《中长期青年发展规划(2016—2025年)》提出,要提升青少年参与社会公益和志愿服务的意识与能力,鼓励青年在经济社会发展中充分发挥生力军和突击队作用,深化青年志愿服务工作。同时,随着我国社会治理格局的不断优化,社会治理的重心也逐渐下移至基层,社区的快速发展,使得大量志愿者涌现,并积极投身于社区志愿服务
学位
随着企业外部市场及经营环境日趋严峻复杂,客户对企业在技术、产品、服务等方面的要求越来越高,这就要求企业必须锐意变革、追求创新突破。从企业内部环境而言,随着“80后”、“90后”等新生代员工逐渐成为职场的主力,企业必须因应新的发展趋势,转变旧有的管理思维和模式,将企业打造成为“赋能平台、共生平台和协同平台”,方能充分激发广大员工的创造力,切实形成技术、产品、管理及服务综合领先优势。因此,探讨和研究员
学位
人类活动导致CO2等温室气体大量排放,造成越来越严重的温室效应并严重威胁到人类粮食安全。如何将CO2减排的环境需求与粮食和饲料生产的经济需求相结合以实现CO2资源的绿色循环利用,日益成为国际研究热点。微藻可通过光合作用高效固定CO2并联产高营养生物质,用作饲料原料能强化养殖动物生产性能、提升动物产品品质。本文分别以钝顶螺旋藻和蛋白核小球藻为研究对象,系统探究了这两种微藻在高效光合固碳和藻粉作为蛋鸡
学位
本翻译实践报告源文本节选自美籍阿富汗裔作家阿妮莎·穆罕默德·乌尔丽卡(Anisa Mahmoud Ulrich)所著自传体小说《掀起我的波卡来——我的难民生涯》。作者在本书中叙述了她在阿富汗的成长经历,从阿富汗逃难到美国的流亡之旅,以及如何在美国克服心理疾病和文化冲击,实现经济独立,反抗家庭暴力,重建新生活的故事。本书中的人物形象鲜明,故事情节曲折,语言朴实生动,较为口语化,颇具感情色彩,心理描写
学位
目前我国精神疾病患者人数在不断日益增长,而其中精神分裂症作为重性精神疾病之一,病情复发率高且迁延慢愈,在康复过程中家庭照顾者成为照顾患者的主体。家庭照顾者在承担长期照顾的负担之下承受着普通家庭难以想象的艰辛以及心理压力,这一弱势群体渴望得到专业的支持与帮助。但目前家庭照顾者群体受关注力度较小,国家政策支持有限。在国家强调全民心理健康,精神卫生工作愈发得到重视的背景下,家庭照顾者群体的心理压力若不排
学位
近年来无线通信市场发展迅猛,对射频收发机的需求不断增大。随着无线通信设备种类的增加以及适用频段的多样化,仅用于特定频带的窄带接收前端已不能满足市场需求。同时,为了迎合通信设备小型化的趋势,全集成射频接收前端的需求将不断提升。本文采用SMIC 55nm工艺设计了一款应用于0.8-5.5GHz通信频段的新型宽带射频接收前端。本设计基于窄带低噪声放大器(Low Noise Amplifier,LNA)和
学位