目的：结直肠癌是外科常见恶性肿瘤之一，尽管近年来有越来越多的患者在发病早期即刻进行准确的根治性手术治疗，但其预后无明显改善，资料显示约有30％的术后患者在五年内死于复发。由此可见，在一部分结直肠癌患者发病早期就已经有微转移发生。众多临床研究发现，淋巴结中存在微转移与患者的临床预后直接相关，有微转移患者的生存率明显低于没有微转移的患者。如何才能早期检测到微转移，是临床研究的重点之一。常规病理检测难以发现淋巴结内肿瘤微转移灶，如果应用更敏感的分子生物学检测方法，就可能及早发现有微转移的结直肠癌患者，从而采取有效的治疗措施，提高患者的生存率。另外，在肿瘤手术中，手术操作因其会对肿瘤组织有机械性刺激，可能会促进肿瘤细胞入血，人为造成肿瘤细胞转移，这就要求手术操作应遵循一定的原则。本课题应用RT-PCR方法，通过对肿瘤标志性基因CD44v与CK20 mRNA的联合检测，希望发现结直肠癌患者不同检测部位可能存在的微转移，对临床综合治疗方案的选择提供帮助。 方法：选择2000年10月至2001年4月在河北医科大学第四医院外科行手术治疗的结直肠癌Dukes分期中的A期3名、B期15名、C期10名、D期3名所有四期 中文摘要患者共31人为实验组，取其区域淋巴结和外周血（区域淋巴结的选取标准为：各取肠旁、系膜中、系膜根最有可能转移的一枚；外周血的标准为：术前24小时和术中1．5毛小时先后共两次）；结直肠癌SW480细胞株为阳性对照组；结直肠良性病变患者5人、健康人5人为阴性对照组，取结直肠良性病变患者病变组织和健康人外周血。通过应用逆转录聚合酶链反应的方法（RTICR）对结直肠癌患者外周血和区域淋巴结、良性病患者病灶组织、健康人外周血、大肠癌SW480细胞株进行CD44V、CK20 InRNA联合检测，取 CD44V”和 CK20”均阳性者为阳性结果；同时应用常规病理学方法检测区域淋巴结。应用扩检验或精确概率法对1、RTFCR方法同常规病理学方法对区域淋巴结检测结果、2、RTICR方法检测术前外周血与区域淋巴结结果3、RTPCR方法检测中晚期结直肠癌与早期直肠癌术前静脉血结果进行统计学比较。 结果：l、A期：3名结直肠癌患者，RT工CR方法与常规病理学检测所有9枚区域淋巳结均为阴性；B期：15名结直肠癌患者，共 45枚区域淋巴结，常规病理学检测均为阴性；而RTICR方法检测：12枚阳性，33枚阴性，其中8人为阳性思者；C期：10名结直肠癌患者，共30枚区域淋巴结，常规病理学检测20枚为阳性，10枚为阴性；RTICR方法检测 24枚阳性，其中包括病理学阳性的 20枚，6枚阴性，10人全部为阳性；D期：3名结直肠癌患者，共9枚区域淋巴结，常规病理学和RTPCR方法检测共同有7枚阳性，2枚阴性，共3人 2 中文摘要 全部为阳性（阳性患者标准判定：应用RTICR方法常 规病理学方法检测有1枚和1枚以上区域淋巴结阳性的 认定为阳性患者）。所有93枚淋巴结，常规病理阳性27 枚，RTPCR阳性43枚，包括常规病理阳性的27枚。 RTICR检测方法同常规病理检测比较差异有显著性 巾司刀00）。2、应用 RTICR检测结直肠癌患者术前 外周血7人为阳性，24人为阴性；术中24名阴性者中又 有2人转为阳性。手术可能操作刺激肿瘤细胞入血。3、 应用RTPCR检测，区域淋巴结阳性检出率比外周血高 中司刀00）4、Dukes A期和 B期术前静脉血阳性结果 同 DSkeS C期和 D期的比较差异有显著性（p＝0．of 2），后 者比前者阳性率高。5、应用RTPCR检测5名结直肠良 性病变患者病变组织、5名健康人外周血的结果均为阴 性。 结论：l、应用RTICR检测方法对大肠癌患者淋巴 结肿瘤标志基因CD44V、CK20进行联合检测比常规病 理检测方法能够发现更多的微转移，因此能够更早的发 现结直肠癌患者区域淋巴结中可能存在的转移灶。淋巴 结是否存在转移同患者的预后高度相关，淋巴结没有转 移的要比有转移的预后好。应用RTFCR法对肿瘤标志 性基因CD44、CK20进行检测，使那些存在微转移的患 者能够及早发现，并接受必要的治疗，最终提高结直肠 癌患者的整体生存率。2、早期结直肠癌患者外周血中就 己经存在肿瘤细胞，也就有发生转移的可能，因此结直 肠癌在早期就是一种全身性疾病。3、结直肠癌患者行 RTICR联合检测区域淋巴结CD44V、CK20的阳性率明 3 中文摘要显高于外周静脉血的检测结果，说明大肠癌中区域淋巴结微转移的发生可能要早于外周静脉血。4、结直?