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背景与目的原发性肝癌,常见的消化系统恶性肿瘤之一,具有高度侵袭性。其发病主要同慢性病毒性乙型、丙型肝炎、各种原因所致的肝硬化和黄曲霉素B1等危险因素有关。肝癌治疗领域的特点是多种方法、多种学科共存,目前首选依然是肝切除术。当下国内的肝癌大背景依然是大多数患者在明确诊断时已经失去了手术根治的机会。鉴于此,探究有助于肝癌复发诊断与预后的分子标志物具有重要的临床价值。人类胶质细胞成熟因子β(GMFB)是一种17k Da、高度保守的脑蛋白。近年来研究发现,GMFB在多种上皮源性恶性肿瘤中表达上调,并且在预测患者的不良预后方面具有一定的临床价值。就目前而言,GMFB在肝细胞癌(HCC)中的表达及其作用的研究尚不够深入。本研究通过检测GMFB在肝细胞癌组织中的表达情况,并分析GMFB表达水平和患者临床病理参数、预后以及肝细胞癌组织中Ki-67表达的关系,探讨GMFB在肝细胞癌中的临床意义。材料和方法肝细胞癌和癌旁组织以及临床病理参数资料均收集于中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)。运用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和蛋白免疫印迹实验(WB)检测36对新鲜冷冻的HCC组织及其癌旁非肿瘤组织中GMFB的m RNA和蛋白的表达情况。运用免疫组化法(IHC)分别检测91例HCC组织及其癌旁非肿瘤组织石蜡包埋的标本切片中GMFB和Ki-67蛋白的表达,根据免疫组化结果划分为阳性表达组和阴性表达组。进一步通过统计学方法分析HCC标本中GMFB阳性表达与HCC患者临床病理因素和术后生存时间之间的联系以及其GMFB与Ki-67表达的相关性。结果共36对新鲜冷冻HCC组织及癌旁组织的q RT-PCR和Western bolt实验结果显示,HCC组织中GMFB m RNA与蛋白的相对表达水平较癌旁组织均明显升高(均P<0.001)。其中,GMFB m RNA在HCC组织及癌旁组织相对表达水平依次为1.67±0.72和1.00±0.51,GMFB蛋白在HCC组织及癌旁组织相对表达水平依次为1.54±0.65和0.90±0.55。91例HCC石蜡切片IHC结果显示,GMFB和Ki-67在HCC组织中的阳性表达的比例均较癌旁组织明显升高(均P<0.001);GMFB的表达与HCC微血管侵犯(P=0.045)、Edmondson分级(P=0.032)、BCLC分期(P=0.012)明显有关;在肝细胞癌组织中,GMFB和Ki-67的表达具有统计学上正相关关系(r_s=0.265,P=0.011)。Kaplan-Meier生存分析显示,GMFB阳性表达的病例的无病生存时间(DFS)及总生存时间(OS)均明显短于GMFB阴性表达的病例(DFS:4.52个月vs.10.48个月,P=0.001;OS:27.67个月vs.39.75个月,P=0.007);Cox多因素回归模型分析显示,GMFB与Ki-67的表达上调是影响HCC患者DFS(HR=0.441,95%CI=0.242～0.801,P=0.007;HR=1.818,95%CI=1.012～3.269,P=0.046)与OS(HR=0.504,95%CI=0.287～0.886,P=0.017;HR=1.787,95%CI=1.083～2.935,P=0.023)的独立危险因素。结论同癌旁组织相比较,GMFB蛋白在HCC中呈现高表达,且与肝细胞癌进展及与患者的不良预后密切相关。同时,GMFB的表达与Ki-67的表达呈正相关,故推测其可能通过对肿瘤细胞增殖活性的调控发挥作用。