鱼腥草注射液作为中药注射剂临床不良反应的代表药物,其再研究和再评价工作具有十分重要的现实意义和示范意义。大量研究发现,鱼腥草注射液不良反应的主要原因在增溶剂。对鱼腥草注射液的增溶剂进行优选研究,是鱼腥草注射液再研究、再评价工作的重要切入点,关系整个中药注射剂行业的发展方向。本论文主要包括以下两个方面的内容：一、文献综述本论文文献综述部分系统概述了三个方面的内容：①静脉用鱼腥草注射液研究概况；②注射剂中吐温80使用及研究概况；③中药注射剂诱发的急性过敏与类过敏反应。为论文的整体研究奠定理论基础。二、试验研究本论文的试验研究主要包括4个方面：1.吐温80及鱼腥草注射液的溶血性比较研究。通过体外溶血试验,结合肉眼观察法与分光光度法,比较不同来源、不同浓度吐温80及其配制的鱼腥草注射液对家兔红细胞溶血作用的差异,评价产品质量、使用浓度对吐温80溶血性的影响。2.吐温80及鱼腥草注射液的致敏性比较研究。选取了不同浓度、不同生产厂家的吐温80及其配制的鱼腥草注射液,通过豚鼠过敏反应试验,Beagle犬、食蟹猴类过敏反应试验,优选鱼腥草注射液中吐温80的质量和安全浓度范围,为保证鱼腥草注射液的安全性提供临床前研究基础。3.吐温80对犬心血管系统的影响。选取多种吐温80进行比较研究,通过观察其对清醒Beagle犬血压、心率的影响,对麻醉犬血流动力学、氧摄取率的影响,进一步验证吐温80的安全性。4.吐温80的药学研究。采用高效液相色谱仪(HPLC)与蒸发光检测器(ELSD)联用,初步检测不同厂家生产的5种吐温80的成分及构成比。本研究的主要结论如下：1.类过敏反应的症候特点与过敏反应(过敏性休克)的表现十分相似,故有学者称之为“过敏样症状”、“过敏样反应”等,根据目前的研究进展及本课题组前期工作,我们初步认为类过敏反应是一类与过敏反应(过敏性休克)表现相似的综合症候群。类过敏反应的主要特点在于：①发生率高,在中药注射剂诱发的过敏性休克中占2/3；②多种物质(抗原、半抗原或非抗原物质),多种机制(补体系统激活、直接刺激靶细胞短时内大量释放组胺等)均可诱发；③多个系统(呼吸、心血管、消化、皮肤黏膜)均可出现症状；④首次用药即可快速出现反应症状；反应强度、症状表现与诱发物有明显量效关系；⑤多次接触诱发物后,反应症状可减轻或消失,出现耐受现象。但是,目前有关类过敏反应的定义,范围,诱发物质,发生机制,症状表现,诊断及鉴别诊断标准,以及正确的预防与处理方法等问题,仍有待进一步深入研究。正确认识类过敏反应,对于中药注射液及其他药物的不良反应,特别是急性致死性反应的防治,有重要意义。2.对于中药注射剂的急性过敏及类过敏反应,鉴于其突发性与严重性,研究的关键在于科学预测、准确判断、合理预防。中药注射剂成分复杂,受组方药味多寡、药材质量、生产工艺等众多因素影响,并含有部分不明成分,为其致敏性研究带来困难。目前,中药注射剂的致敏性研究仍缺少公认的动物模型和判断标准。在进行药物临床前评价时,传统的豚鼠过敏试验假阴性率较高；特别是对中药注射剂诱发的类过敏反应,假阴性率更高。在本课题研究基础上,我们建议,对于中药注射剂的过敏及类过敏反应评价,应进行2部分实验：①I型超敏反应试验,可选用豚鼠,以症状表现为主要判定标准,IgE升高为辅助指标；②类过敏反应试验,选用Beagle犬,以症状表现及组胺升高为主要判断标准,类胰蛋白酶、补体成分等检测可做为辅助指标。3.吐温80作为目前我国中药注射剂中常用的增溶剂品种,对各类难溶性中药成分均有较好增溶效果。中药注射剂使用吐温80是增加药物溶解度、维持澄明度稳定的重要措施。由于吐温80自身是一种混合物,成分复杂,难以控制,且具有一定的药理活性和不良反应,在临床应用时,尤其是静脉用药时,必须严格控制吐温80的质量、浓度和用量,以保证安全性。吐温80是导致鱼腥草注射液临床严重不良反应的主要原因,吐温80的致敏性与产品有关且有明显量效关系。通过对吐温80进行的系列优选研究,我们认为,提高吐温80质量,并将中药注射剂中吐温80的使用浓度限定在0.3%及以下,可在保证增溶效果的同时,有效避免溶血、类过敏反应的发生。考虑临床上老年患者及易敏人群等特殊情况的存在,在使用含吐温80类药物时,仍有一定风险,需提高警惕,不可大意4.吐温80成分复杂,对其进行药学分析,以期制定静脉用吐温80质量标准,并最终寻找并去除吐温80中的致敏成分或杂质,是保证吐温80静脉用药安全性的根本所在。本研究的创新点如下：1.建立、完善中药注射剂致敏性评价体系。改进豚鼠全身主动过敏反应试验及Beagle犬类过敏反应试验方法。进行过敏反应评价,首选豚鼠全身主动过敏试验；进行类过敏反应评价,首选Beagle犬类过敏反应试验,必要时可进行猴类过敏反应试验。2.初步探索吐温80对麻醉犬血流动力学、氧代谢的影响。吐温80可导致麻醉犬动脉血压、冠脉血流量、脑血流量、氧摄取率降低,但其对心脏功能的影响是短暂的、一过性的。血流动力学试验可用以评价吐温80对心、脑血管系统,肾脏等重要脏器的影响,为吐温80的安全性研究提供参考。3.对吐温80成分组成进行初步药学分析。建立高效液相色谱仪与蒸发光检测器联用试验方法,用于初步检测吐温80的成分及杂质含量,评价吐温80纯度的高低。但该方法难以细分各成分峰中的化学成分,仍有待进一步探索,以期为提高吐温80的质量,寻找并去除吐温80致敏成分或杂质提供技术支持。4.通过系列比较研究,优选中药注射剂中吐温80质量,寻找安全浓度范围。